&

機(jī)構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置：首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > 基因?qū)耄╒irus、Vectors） > 重組腺相關(guān)病毒(AAV)制品 > AAV病毒 AAVpro^® Helper Free System (AAV-CRE Recombinase)

AAV病毒 AAVpro^® Helper Free System (AAV-CRE Recombinase)
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	6668	AAVpro^® Helper Free System (AAV1-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6652	AAVpro^® Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6653	AAVpro^® Helper Free System (AAV5-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011
Takara	6654	AAVpro^® Helper Free System (AAV6-CRE Recombinase)	20 μg each	￥8,011

收藏產(chǎn)品加入購物車

■ 制品說明

腺相關(guān)病毒 (AAV) 是Dependovirus屬Parvovirus家族的無包膜病毒。AAV對人無致病性，只有在輔助病毒如腺病毒或皰疹病毒存在下才能復(fù)制。AAV基因組是約4.7 kb的單鏈線狀DNA分子，在每個(gè)末端都有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的反向末端重復(fù)序列 (ITRs) ，ITRs的功能在于基因組復(fù)制起始位點(diǎn)及包裝病毒粒子。AAV基因組包含了3個(gè)開放閱讀框 (圖1) ：Rep編碼參與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)；Cap編碼病毒衣殼蛋白質(zhì)；AAP編碼用于病毒粒子形成的非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。Rep區(qū)域編碼4種不同的蛋白質(zhì) (Rep78, Rep68, Rep52和Rep40) ，Cap區(qū)域編碼3種不同的蛋白質(zhì) (VP1, VP2和VP3) 。
AAV有100多種血清型，不同血清型病毒間的宿主特異性和特點(diǎn)有所不同。Takara Bio Inc.提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 的制備試劑盒。2型 (AAV2) 具有廣泛的研究應(yīng)用，包括基因治療，也具備泛嗜性特點(diǎn)。而AAV1、AAV5和AAV6卻受限于組織宿主。AAV1對于肌肉、肝臟、呼吸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；AAV5對于中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟和視網(wǎng)膜有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；AAV6對于心肌細(xì)胞、肌肉和肝臟有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。
腺相關(guān)病毒載體 (AAV載體) 能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入細(xì)胞和生物體，可用作研究工具和基因治療的載體。另外，AAV載體較腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體更安全。AAV載體能用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入增殖和非增殖細(xì)胞，以及在未分裂細(xì)胞內(nèi)的長期表達(dá)，AAV很少有免疫原性，非常適用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi) (作為體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)工具) 。
本制品制備的AAV病毒可傳遞Cre基因編碼的loxP依賴型重組酶。Cre重組酶已經(jīng)廣泛用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠和各種篩選檢測。

圖1.
使用AAVpro Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase) (Code No. 6652)制備 AAV2-Cre病毒，并使用AAVpro Purification Kit (AAV2) (Code No. 6232)純化該病毒。以100 vg/cell或者12,500 vg/cell AAV2-Cre病毒粒子感染表達(dá)loxP-ZsGreen1的HEK293 細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著感染細(xì)胞時(shí)所采用的AAV2-Cre病毒粒子數(shù)量的增加，表達(dá)ZsGreen1的細(xì)胞比例也隨之增加。

■ 制品特點(diǎn)

使用AAV Helper Free System制備AAV病毒
AAV Helper Free System是一種特別的可制備高滴度AAV的無輔助病毒系統(tǒng) (圖2) 。試劑盒包含3種質(zhì)粒，只需將制備AAV病毒所需的這3種載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染于HEK293細(xì)胞中，即可制備AAV病毒。
·pRC2-mi342 Vector：包含AAV2的Rep基因和Cap基因
*pRC2-mi342可表達(dá)hsa-miR-342，hsa-miR-342是一種病毒制備系統(tǒng)中可提高病毒滴度的人源miRNA。與一般只表達(dá)Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比，病毒滴度可提高2倍。
·pHelper Vector：包含腺病毒的E2A、E4和VA基因的載體質(zhì)粒。
·pAAV-CRE Recombinase Vector：
包含目的基因表達(dá)啟動(dòng)子和2個(gè)ITR的載體質(zhì)粒。本載體制備的AAV病毒可傳遞Cre基因編碼的loxP依賴型重組酶。Cre重組酶已經(jīng)廣泛用于制備轉(zhuǎn)基因小鼠和各種篩選檢測。

圖2.使用AAVpro Helper Free System 制備AAV病毒

■ 制品內(nèi)容

AAVpro^® Helper Free System (AAV1-CRE Recombinase) （Code No. 6668）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC1 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV2-CRE Recombinase) （Code No. 6652）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M83], [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV5-CRE Recombinase) （Code No. 6653）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC5 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]

AAVpro^® Helper Free System (AAV6-CRE Recombinase) （Code No. 6654）

pAAV-CRE Recombinase Vector (1 μg/μl)	20 μl
pRC6 Vector (1 μg/μl)	20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl)	20 μl
AAV Extraction Solution A	1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B	150 μl×3

Limited Use Label License: [M84]