■ 制品說明 | ||||||||||||||
腺相關(guān)病毒 (AAV) 是Dependovirus屬Parvovirus家族的無包膜病毒。AAV對人無致病性,只有在輔助病毒如腺病毒或皰疹病毒存在下才能復(fù)制。AAV基因組是約4.7 kb的單鏈線狀DNA分子,在每個末端都有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的反向末端重復(fù)序列 (ITRs) ,ITRs的功能在于基因組復(fù)制起始位點及包裝病毒粒子。AAV基因組包含了3個開放閱讀框 (圖1) :Rep編碼參與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì);Cap編碼病毒衣殼蛋白質(zhì);AAP編碼用于病毒粒子形成的非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。Rep區(qū)域編碼4種不同的蛋白質(zhì) (Rep78, Rep68, Rep52和Rep40) ,Cap區(qū)域編碼3種不同的蛋白質(zhì) (VP1, VP2和VP3) 。 AAV有100多種血清型,不同血清型病毒間的宿主特異性和特點有所不同。Takara Bio Inc.提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 的制備試劑盒。2型 (AAV2) 具有廣泛的研究應(yīng)用,包括基因治療,也具備泛嗜性特點。而AAV1、AAV5和AAV6卻受限于組織宿主。AAV1對于肌肉、肝臟、呼吸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率;AAV5對于中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟和視網(wǎng)膜有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率;AAV6對于心肌細(xì)胞、肌肉和肝臟有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。 腺相關(guān)病毒載體 (AAV載體) 能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入細(xì)胞和生物體,可用作研究工具和基因治療的載體。另外,AAV載體較腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體更安全。AAV載體能用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入增殖和非增殖細(xì)胞,以及在未分裂細(xì)胞內(nèi)的長期表達(dá),AAV很少有免疫原性,非常適用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入動物體內(nèi) (作為體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)工具) 。 本載體用于制備傳遞LacZ表達(dá)盒的AAV病毒。AAV-LacZ病毒可作為體外和體內(nèi)基因轉(zhuǎn)移的對照。 |
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圖1. 使用AAVpro Helper Free System (AAV2-LacZ) (Code No. 6655)制備AAV2- LacZ病毒,使用AAVpro Purification Kit (AAV2) (Code No. 6232)純化AAV2-LacZ病毒。將病毒感染HT1080細(xì)胞。使用Beta-Galactosidase Staining Kit (Code No. 631780)進(jìn)行染色。 |
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■ 制品特點 | ||||||||||||||
使用AAV Helper Free System制備AAV病毒 AAV Helper Free System是一種特別的可制備高滴度AAV的無輔助病毒系統(tǒng) (圖2) 。試劑盒包含3種質(zhì)粒,只需將制備AAV病毒所需的這3種載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染于HEK293細(xì)胞中,即可制備AAV病毒。 ·pRC2-mi342 Vector:包含AAV2的Rep基因和Cap基因 *pRC2-mi342可表達(dá)hsa-miR-342,hsa-miR-342是一種病毒制備系統(tǒng)中可提高病毒滴度的人源miRNA。與一般只表達(dá)Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比,病毒滴度可提高2倍。 ·pHelper Vector:包含腺病毒的E2A、E4和VA基因的載體質(zhì)粒。 ·pAAV-LacZ Vector: 包含目的基因表達(dá)啟動子和2個ITR的載體質(zhì)粒。本載體用于制備傳遞LacZ表達(dá)盒的AAV病毒。AAV-LacZ病毒可作為體外和體內(nèi)基因轉(zhuǎn)移的對照。 |
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圖2.使用AAVpro Helper Free System 制備AAV病毒 | ||||||||||||||
■ 制品內(nèi)容 | ||||||||||||||
AAVpro® Helper Free System (AAV1-LacZ) (Code No. 6669) | ||||||||||||||
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AAVpro® Helper Free System (AAV2-LacZ) (Code No. 6655) | ||||||||||||||
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AAVpro® Helper Free System (AAV5-LacZ) (Code No. 6656) | ||||||||||||||
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AAVpro® Helper Free System (AAV6-LacZ) (Code No. 6657) | ||||||||||||||
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■ 各載體序列 | ||||||||||||||
zip壓縮形式,點擊查看: · pAAV-LacZ(fasta data) · pHelper(fasta data) · pRC1(fasta data) · pRC5(fasta data) · pRC6(fasta data) · pRC2-mi342(fasta data) |
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■ 保存 | ||||||||||||||
-20℃。 AAV Extraction Solution A 和AAV Extraction Solution B融解后,請于室溫保存。 |
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頁面更新:2024-02-29 10:24:01