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腺病毒滴度測定
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價格（元）	說明書	數(shù)量
Clontech	632270	Adeno-X GoStix	20 Tests	￥5,121
Clontech	632250	Adeno-X Rapid Titer Kit	120 Ttitrations	￥7,023
Clontech	632252	Adeno-X qPCR Titration Kit	Each	￥6,249

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無標(biāo)題文檔

· Adeno-X Rapid Titer Kit是一種功能滴度測定方法，基于腺病毒六鄰體蛋白質(zhì)進(jìn)行測定。
· Adeno-X qPCR Titration Kit是一種使用定量PCR技術(shù)測定腺病毒滴度的方法，快速、簡單、高效。
· Adeno-X GoStix是一種即時靈敏的腺病毒滴度測定方法，可以在病毒擴(kuò)增過程中提早檢測腺病毒，確定收獲病毒的理想時間。

Adeno-X Rapid Titer Kit

該試劑盒中包含一種六鄰體蛋白質(zhì)特異性抗體，用于標(biāo)記感染細(xì)胞。六鄰體蛋白質(zhì)由腺病毒基因組編碼，是腺病毒衣殼的重要組成部分，為腺病毒復(fù)制所需要，但是它的表達(dá)需要依賴于E1基因產(chǎn)物。因此，像HEK 293這樣的E1基因反式互補(bǔ)細(xì)胞類型，可以用來測定腺病毒感染活性，原因是只有細(xì)胞被感染才能表達(dá)六鄰體蛋白質(zhì)。這種快速測定方法需要先花費(fèi)1-2小時建立體系，兩天后再花費(fèi)大約3小時對細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記、染色和計數(shù)。每個染色細(xì)胞對應(yīng)一個感染單位。這種檢測方法可與1型、2型、5型和6型人腺病毒相兼容。我們已經(jīng)對基于5型人腺病毒的Adeno-X病毒進(jìn)行了驗證，Adeno-X病毒由Takara Adeno-X腺病毒載體系統(tǒng)所制備。

Adeno-X qPCR Titration Kit

這種測定方法可以用于檢測所有Ad5-based腺病毒載體，當(dāng)然也可以檢測使用Takara Adeno-X腺病毒載體系統(tǒng)所制備的重組腺病毒。結(jié)合使用了qPCR和TB Green，這樣就可以依據(jù)校準(zhǔn)的DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定腺病毒制劑（如粗裂解液或純化病毒粒子）中的病毒基因組拷貝數(shù)。這種測定方法只需要大約4小時就可得出檢測結(jié)果，而由于qPCR滴定花費(fèi)時間短，所以實驗人員在收獲病毒的同一天，就可以使用經(jīng)過準(zhǔn)確滴定的病毒去感染目標(biāo)細(xì)胞。

Adeno-X GoStix

這是一種即時靈敏 (～10 min)的腺病毒滴度測定方法，讓您可以對腺病毒是否制備完畢迅速做出判斷以做好使用準(zhǔn)備，也是確定擴(kuò)增后收獲病毒最佳時間的理想選擇。只需要將20 μl培養(yǎng)液上清添加至GoStix檢測板上樣孔中，隨后滴加4滴緩沖液，等待2-20分鐘，檢測板上的檢測窗口會出現(xiàn)一條帶。在上清液中檢測到的腺病毒數(shù)量與細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的腺病毒是密切相關(guān)的。每次測試都可以保證足夠高的靈敏度，使用少量病毒上清液就可以進(jìn)行檢測，也可以用于確保在腺病毒擴(kuò)增過程中獲得盡可能大的病毒收量（我們使用這些檢測板來確定從感染細(xì)胞中收獲病毒的最佳時間）。感染HEK293細(xì)胞后，每天只需要取20 μl上清液進(jìn)行檢測。檢測窗口出現(xiàn)一條顏色很深的Test條帶，可以確保在產(chǎn)毒高峰時期收獲高滴度的腺病毒。

Overview

· 使用Adeno-X Rapid Titer Kit (六鄰體檢測) 可在3小時內(nèi)獲得功能滴度
· 與空斑形成試驗或者終點(diǎn)稀釋法相比，Adeno-X Rapid Titer Kit (六鄰體檢測)更準(zhǔn)確、更省時
· 使用Adeno-X qPCR Titration Kit (基因組檢測)可4小時完成滴度檢測
· 使用Adeno-X GoStix可在10分鐘內(nèi)定性測定腺病毒滴度，快速確定收獲病毒最佳時間

TECH NOTE

Simplify adenovirus production with a simple and rapid titer test

Adenoviral titration by quantitative PCR

FAQs

Questions about adenoviral vector systems, purification and titration

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