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■ 制品內(nèi)容*4 (Code No. MK500 20 次量) |
1. Labeling Safe Buffer |
500 μl × 2 |
2. TdT Enzyme*1 |
50 μl × 2 |
3. Anti-FITC HRP Conjugate*2 |
1.5 ml × 1 |
4. Control Slides*3 |
2 slides |
5. Permeabilisation Buffer |
1.0 ml × 2 |
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*1:TdT Enzyme是來源于E. coli的重組蛋白質(zhì)。
*2:兔多克隆抗體。
*3:Control Slides是大鼠乳腺組織的石蠟包埋組織切片。作為陽性對照使用時(shí),需要進(jìn)行脫石蠟處理,請參照說明書中“操作方法,C. 石蠟包埋組織切片”的實(shí)驗(yàn)操作方法。在脫石蠟和Proteinase K處理后,請參考操作方法中的檢測方法。
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4 每個(gè)組份可以單獨(dú)購買
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(1)Labeling Safe Buffer(Code No. MK501) |
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500 μl×10 |
(2)TdT Enzyme(Code No. MK502) |
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50 μl×10 |
(3)Anti-FITC HRP Conjugate (Code No. MK503) |
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1.5 ml×5 |
(4)Control Slides(Code No. MK504) |
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2 slides×5 |
(5)Permeabilisation Buffer(Code No. MK505) |
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1.0 ml×10 |
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■ 制品說明 |
細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是生命個(gè)體中的調(diào)控基因,為了維持個(gè)體生命,調(diào)控細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝,促使不需要的細(xì)胞或者具有危險(xiǎn)性的細(xì)胞自我凋亡的現(xiàn)象,與細(xì)胞的生長、分化、生理現(xiàn)象(特別在免疫方面)有著密切關(guān)系。近期研究表明,細(xì)胞凋亡在癌細(xì)胞的發(fā)生過程中,或在放射線、熱能等物理因素以及藥物等化學(xué)因素對癌細(xì)胞生長的抑制、癌細(xì)胞的消失、癌細(xì)胞的分化誘導(dǎo)過程中都起著重要作用。因此,近期在癌癥控制研究方面,細(xì)胞凋亡也為科研人員所廣泛關(guān)注。
發(fā)生細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的特征之一,是染色體DNA以核小體為單位(185 bp)進(jìn)行DNA片斷化,這些DNA片段可以通過DNA的末端標(biāo)記法進(jìn)行組織學(xué)檢定。本試劑盒使用了TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法,通過對in situ標(biāo)記DNA片段的檢測,可以有效地檢定局部組織或單個(gè)細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。
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■ 保存 |
1、2、5: -20℃
3: 4℃(第一次融解后請于4℃保存)
4: 室溫
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■ 試劑盒原理 |
TUNEL法利用TdT酶的作用,對凋亡細(xì)胞中的片斷化DNA的3’-OH游離末端進(jìn)行高效特異性標(biāo)記fluorescein-dUTP,然后使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行觀察。對摻入的fluorescein,同時(shí)也可以通過過氧化物酶標(biāo)記的抗fluorescein抗體進(jìn)行檢出,與顯色化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)后可以使用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。 |
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■ 試劑盒特性 |
1. 操作簡便:使用Ready-to-Use型試劑。
2. 高靈敏度:可以單一檢出初期的凋亡細(xì)胞。
3. 高特異性:與壞死細(xì)胞相比,能特異性染色凋亡細(xì)胞。
4. 使用靈活:可應(yīng)用于組織切片、固定細(xì)胞等。
可使用熒光顯微鏡、光學(xué)顯微鏡等觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
可以單獨(dú)購買組份。
5. 高正確性:配有陽性對照,可以確認(rèn)試劑盒的有效性及用于熟悉實(shí)驗(yàn)流程。
6. 高安全性:Buffer中不含危險(xiǎn)試劑,如二甲砷酸鈉。
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