■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×50 次量) | ||||||||||||||
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■ 制品說(shuō)明 | ||||||||||||||
金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) 是一種存在于人、動(dòng)物皮膚和消化道中的病原菌,其在食物中繁殖產(chǎn)生的腸毒素可引起食物中毒。本制品是以在菌種間具有多樣性的管家基因DnaJ為目的基因,使用Real Time PCR方法對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)的試劑盒。
制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,可以有效地抑制在配制反應(yīng)液時(shí)發(fā)生的引物錯(cuò)配及引物二聚體引起的非特異性PCR擴(kuò)增,大大提高PCR的檢測(cè)靈敏度。
本制品采用Cycling Probe法進(jìn)行檢測(cè),Cycling Probe法是由RNA和DNA構(gòu)成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法,能夠高效率地檢出擴(kuò)增過(guò)程中及擴(kuò)增結(jié)束時(shí)的目的基因片段。Cycling Probe內(nèi)部含有RNA堿基,一端標(biāo)記熒光物質(zhì),另一端標(biāo)記熒光淬滅物質(zhì),當(dāng)探針處于完整狀態(tài)時(shí),由于熒光淬滅作用抑制熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,但當(dāng)探針與擴(kuò)增產(chǎn)物中的互補(bǔ)序列雜交后,RNase H在RNA部分將探針切斷,淬滅抑制作用解除,熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。通過(guò)測(cè)定熒光強(qiáng)度,能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)控?cái)U(kuò)增產(chǎn)物量。 制品中金黃色葡萄菌的DnaJ基因用FAM標(biāo)記,內(nèi)參照 (Internal Control) 檢測(cè)用ROX標(biāo)記探針。在同一反應(yīng)管內(nèi)可以對(duì)DnaJ基因及內(nèi)參照同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增,通過(guò)兩種不同熒光標(biāo)記的探針可以對(duì)DnaJ基因及內(nèi)參照同時(shí)檢出。其中,對(duì)內(nèi)參照反應(yīng)的檢測(cè),可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進(jìn)行,防止假陰性結(jié)果。本檢測(cè)無(wú)需電泳,簡(jiǎn)單快速,靈敏度高,特異性好。 |
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頁(yè)面更新:2024-05-07 13:16:12