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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置:首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > 應(yīng)用檢測(食品-環(huán)境-人) > 食物中毒檢測 (Real Time PCR) > 沙門氏菌檢測試劑盒CycleavePCR Salmonella Detection Kit Ver.2.0
沙門氏菌檢測試劑盒CycleavePCR Salmonella Detection Kit Ver.2.0
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格(元) 說明書 數(shù)量
Takara CY205 CycleavePCR Salmonella Detection Kit Ver.2.0 50 Rxns ¥2,063
無標題文檔
 
■ 制品內(nèi)容 (25 μl × 50次量)
2X Cycleave Reaction Mixture (2X conc.)
625 μl
SIN Primer/Probe Mix (FAM、ROX標記) (5X conc.)*
250 μl
dH2O 1 ml
SIN Positive Control
150 μl (30次反應(yīng)量)
   
* 含熒光標記探針,應(yīng)避光保存。引物由SHIMADZU CORPORATION生產(chǎn)制造。
 
 
■ 制品說明
沙門氏菌 (Salmonella) 是與E.CoilShigella同屬于一群的重要腸道致病菌,這一類細菌在自然界中分布很廣,其中有2,500多種被確認為血清型。近年來由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急劇增加。
本制品是對大部分沙門氏菌都具有的基因-侵襲蛋白A (invasion protein A,invA) 基因進行快速、準確檢出的Real Time PCR試劑盒。在PCR反應(yīng)中每個循環(huán)包括三個過程:模板變性、引物退火、聚合酶作用下的延伸,該反應(yīng)可以實現(xiàn)目的基因的指數(shù)倍擴增,使用Real Time PCR可實時監(jiān)測擴增過程。 制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,可防止在循環(huán)反應(yīng)前因引物錯配、引物二聚體所產(chǎn)生的非特異性擴增。
該檢測使用了Cycling Probe法。Cycling Probe法是由RNA和DNA構(gòu)成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法,能夠高效率地檢出擴增過程中及擴增結(jié)束時的目的基因片段。Cycling Probe內(nèi)部含有RNA堿基,一端標記熒光物質(zhì),另一端標記熒光淬滅物質(zhì),當(dāng)探針處于完整狀態(tài)時,由于熒光淬滅作用抑制熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,但當(dāng)探針與擴增產(chǎn)物中的互補序列雜交后,RNase H在RNA部分將探針切斷,淬滅抑制作用解除,熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,通過測定熒光強度,能夠?qū)崟r監(jiān)控擴增產(chǎn)物量。
制品中檢測沙門氏菌invA基因的探針熒光物質(zhì)使用了FAM標記,內(nèi)參照檢測用探針的熒光物質(zhì)使用了ROX標記,在同一反應(yīng)管內(nèi)對沙門氏菌invA基因及內(nèi)參照 (Internal Control) 同時進行擴增,通過兩種不同熒光標記探針可以對invA基因和內(nèi)參基因同時檢定,實現(xiàn)雙通道同步檢測。其中,對內(nèi)參照反應(yīng)的檢測,可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進行,防止假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。本檢測無需電泳,簡單快速,靈敏度高、特異性強。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事項
1. Real Time PCR儀的使用請按照說明書進行。
2. 如果雜合探針、引物因混入核酸酶而被降解,則不能準確進行檢測。實驗者的汗液和唾液也會帶入核酸酶,操作時應(yīng)注意。
3. PCR反應(yīng)是靈敏度非常高的反應(yīng)。為防止污染,建議從反應(yīng)液的配制到檢測的實驗過程中,設(shè)定以下3個實驗區(qū)域,并進行物理性隔離。
  區(qū)域1:反應(yīng)液的配制及分裝。
區(qū)域2:檢測樣品的制備。
區(qū)域3:向反應(yīng)液中添加檢測樣品,進行反應(yīng)、檢出。
由于本制品使用Real Time PCR法,擴增反應(yīng)與檢測同時進行,反應(yīng)后的擴增產(chǎn)物不需要再進行電泳。為了避免污染,嚴禁從Tube管中取出擴增產(chǎn)物。
4. 使用本制品獲得的結(jié)果是以Real Time PCR儀的分析為基礎(chǔ)來判定的。如果Real Time PCR儀的任一功能出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致錯誤的判定結(jié)果,因此,要依據(jù)儀器說明書來正確設(shè)置Real Time PCR儀。
 

頁面更新:2024-05-07 13:16:30