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■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×100次量) |
TB Green Premix Ex Taq GC*1 (2×conc.) |
625 μl × 2支 |
TUF Primer Mix (5×conc.) |
250 μl × 2支 |
dH2O |
1 ml |
ROX Reference Dye*2 (50×conc.) |
50 μl |
ROX Reference Dye II*2 (50×conc.) |
50 μl |
TUF Positive Control (1×105 Copies/μl) |
100 μl |
EASY Dilution (for Real Time PCR) |
1ml × 2支 |
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*1 含有TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, Mg2+, and TB Green。
*2 用于Applied Biosystems Real Time PCR擴(kuò)增儀,用以校正孔與孔之間的熒光信號誤差。
◆ 使用ROX Reference Dye的PCR儀
· StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II的PCR儀
· Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不使用ROX Reference Dye或ROX Reference Dye II的PCR儀
· Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960:終賣)
· Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(Code No. TP700/TP760:終賣) |
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■ 制品說明 |
本制品是使用Real Time PCR方法對細(xì)菌數(shù)進(jìn)行定量的試劑盒。同常規(guī)需要2-4天的培養(yǎng)時(shí)間相比,本制品可快速地獲得檢測結(jié)果,能夠有效應(yīng)用于食品、環(huán)境管理領(lǐng)域。常規(guī)方法因菌種的適宜培養(yǎng)條件不同,要考慮檢測樣本的種類及儲存條件等,因此,對檢測樣本中存在的菌種所需要的培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度要花費(fèi)很大功夫。使用本制品可一次性地檢測多種菌種,而且不必考慮特殊培養(yǎng)條件。
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■ 保存 |
◇ TB Green Premix Ex Taq GC 4℃避光保存保存,保存6個(gè)月性能穩(wěn)定。保存時(shí)要避免污染。
注:長期保存時(shí)-80℃保存。勿存于-20℃,產(chǎn)品融解后請與4℃保存,并在6個(gè)月內(nèi)用完。 ◇ 其他組份 -20℃保存。 |
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■ 檢測基因 |
目前,對細(xì)菌的檢測方法是通過PCR法擴(kuò)增16S rRNA,由于16S rRNA在細(xì)菌菌種間的拷貝數(shù)不同,因此無法進(jìn)行準(zhǔn)確定量。本制品是以菌種間存在性高、染色體上拷貝數(shù)低 (1或2個(gè)拷貝) 的蛋白質(zhì)延伸因子Tu (tuf) 為靶基因進(jìn)行檢測的試劑盒。
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■ Real Time PCR方法 |
Real Time PCR方法是在PCR擴(kuò)增過程中,通過測定熒光強(qiáng)度實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增產(chǎn)物量的一種快速、準(zhǔn)確定量的檢測方法。制品中的TB Green Premix Ex Taq GC是一種嵌合熒光染料檢測法用試劑,對GC序列含量高的DNA片段也可以很好地進(jìn)行擴(kuò)增,適用于多種菌種的檢測。
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