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■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×50 次量) |
2×Premix for Porcine*1 |
650 μl |
Primer Mix for Porcine*2 |
50 μl |
Probe Mix for Porcine*3 |
50 μl |
dH2O |
1 ml |
Control DNA for Porcine (10 ng/μl) |
15 μl |
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*1 2×Premix For Porcine中含有反應(yīng)用dNTP Mixture、Buffer、酶等。
*2 Primer Mix for Porcine中含有擴增用引物及內(nèi)參照(Internal Control)。
*3 Probe Mix for Porcine中含有檢測用探針,須避光保存。 |
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■ 制品說明 |
本制品是利用Real Time PCR技術(shù)快速檢測豬*基因組DNA的試劑盒。采用雙標(biāo)記熒光PCR技術(shù),根據(jù)線粒體DNA cytochrome c oxidase subunit I (COX I) 基因上動物種間多態(tài)性的差異進行豬源性成分鑒定。應(yīng)用多色熒光檢測技術(shù),對反應(yīng)液中含有的兩種不同熒光染料進行雙通道同步檢測,在同一反應(yīng)管內(nèi)對豬的COX I基因及內(nèi)參照 (Internal Control) 反應(yīng)同時進行擴增,并通過標(biāo)記兩種不同熒光物質(zhì) (FAM、HEX) 的特異性探針進行特異性雜交,實現(xiàn)多色熒光同步檢測。其中對內(nèi)參照反應(yīng)的檢測,可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進行,防止假陰性結(jié)果。制品中2X Premix for Porcine已經(jīng)將DNA聚合酶、反應(yīng)用Buffer、dNTP等試劑預(yù)混在一起。進行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分簡單。PCR反應(yīng)用DNA聚合酶使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,與Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer組合使用,可以有效抑制非特異性的PCR擴增,大大提高了PCR的擴增效率。本檢測無需電泳,簡單快速。本制品適用于食品、化妝品和飼料等樣品中豬源性成分的鑒別。
本試劑盒(原Code No. D320)為《SN/T 2051-2008食品、化妝品和飼料中牛羊豬源性成分檢測方法實時PCR法》附錄D所述試劑盒。 |
*:本制品經(jīng)驗證可對常見豬的品種進行檢出,如家豬(Sus scrofa domesticus)等,但由于檢測品種不同,擴增序列可能存在變異,因此某些品種的豬可能無法被檢出。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 注意事項 |
1. 本試劑盒檢測靈敏度高,為了防止污染,實驗要分區(qū)操作。
① 第一區(qū):反應(yīng)液配制區(qū)。
② 第二區(qū):樣品制備區(qū)。
③ 第三區(qū):樣品添加區(qū)及反應(yīng)檢測區(qū)。
三個區(qū)之間必須進行物理性隔離, 避免人為因素造成污染。
2. 2×Premix for Porcine制品融解后,請上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。
3. Probe Mix for Porcine應(yīng)避光保存。
4. 配制Real Time PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強光照射。
5. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。 |
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