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| ■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×50 次量) |
| 2X Premix for Ovine*1 |
650 μl |
| Primer Mix for Ovine*2 |
50 μl |
| Probe Mix for Ovine*3 |
50 μl |
| dH2O |
1 ml |
| Control DNA for Ovine (10 ng/μl) |
15 μl |
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*1 2X Premix For Ovine中含有反應(yīng)用dNTP Mixture、Buffer、酶等。
*2 Primer Mix for Ovine中含有擴(kuò)增用引物及內(nèi)參照 (Internal Control)。
*3 Probe Mix for Ovine中含有檢測用探針，須避光保存。 | |
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| ■ 制品說明 |
本制品是利用Real Time PCR技術(shù)快速檢測羊（綿羊和山羊*）基因組DNA的試劑盒。采用雙標(biāo)記熒光PCR技術(shù)，根據(jù)線粒體DNA cytochrome c oxidase subunit I（COX I）基因上動(dòng)物種間多態(tài)性的差異進(jìn)行羊源性成分鑒定。應(yīng)用多色熒光檢測技術(shù)，對反應(yīng)液中含有的兩種不同熒光染料進(jìn)行雙通道同步檢測，在同一反應(yīng)管內(nèi)對羊的COX I基因及內(nèi)參照（Internal Control）同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增，并通過標(biāo)記兩種不同熒光物質(zhì)（FAM、HEX）的特異性探針進(jìn)行特異性雜交，實(shí)現(xiàn)多色熒光同步檢測。其中對內(nèi)參照反應(yīng)的檢測，可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進(jìn)行，防止假陰性結(jié)果。制品中2X Premix for Ovine已經(jīng)將DNA聚合酶、反應(yīng)用Buffer、dNTP等試劑預(yù)混在一起。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，PCR反應(yīng)液的配制十分簡單。PCR反應(yīng)用DNA聚合酶使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq? HS，與Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer組合使用，可以有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增，大大提高了PCR的擴(kuò)增效率。本檢測無需電泳，簡單快速。本制品適用于食品、化妝品和飼料等樣品中羊（綿羊和山羊）源性成分的鑒別。
本試劑盒（原Code No. D319）為《SN/T 2051-2008食品、化妝品和飼料中牛羊豬源性成分檢測方法實(shí)時(shí)PCR法》附錄C所述試劑盒。 |
| *：本制品經(jīng)驗(yàn)證可對常見羊的品種進(jìn)行檢出，如綿羊(Sheep)、山羊(Goat)等，但由于檢測品種不同，擴(kuò)增序列可能存在變異，因此某些品種的羊可能無法被檢出。另外，對于鴨（Duck）、鵝（Goose）、馬（Horse）、豬（pork）、雞（chicken）、兔（rabbit）、水牛 (Bubalus bubalis)、牦牛 (Bos grunniens)、黃牛 (Bos taurus)、人（Human）、White Tail Deer (白尾鹿)、Axis Deer (印度梅花鹿)、Turkey(火雞）和Ostrich(鴕鳥）等這些物種，添加genome DNA 10 ng量時(shí)，無檢出或有檢出時(shí)但Ct值在35以上。（上述記載以外的物種沒進(jìn)行過確認(rèn)。） |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 注意事項(xiàng) |
1. 本試劑盒檢測靈敏度高，為了防止污染，實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
① 第一區(qū)：反應(yīng)液配制區(qū)。
② 第二區(qū)：樣品制備區(qū)。
③ 第三區(qū)：樣品添加區(qū)及反應(yīng)檢測區(qū)。
三個(gè)區(qū)之間必須進(jìn)行物理性隔離， 避免人為因素造成污染。
2. 2X Premix for Ovine制品融解后，請上下顛倒輕輕均勻混合，避免起泡，并經(jīng)輕微離心后使用。
3. Probe Mix for Ovine應(yīng)避光保存。
4. 配制Real Time PCR反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
5. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等，盡量避免污染。 |
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| ■ 各物種檢出結(jié)果例 |
| 物種 |
檢測結(jié)果（Genome DNA 10 ng量添加） |
| 綿羊（Sheep） |
有檢出 |
| 山羊（Goat） |
有檢出 |
| 鴨（Duck） |
沒有檢出 |
| 鵝（Goose） |
有Ct值，但大于35圈 |
| 馬（Horse） |
沒有檢出 |
| 豬（Pork） |
沒有檢出 |
| 雞（Chicken） |
沒有檢出 |
| 兔（Rabbit) |
沒有檢出 |
| 水牛 (Bubalus bubalis） |
沒有檢出 |
| 牦牛 (Bos grunniens） |
有Ct值，但大于35圈 |
| 黃牛 (Bos taurus） |
沒有檢出 |
| 人（Human） |
沒有檢出 |
| 白尾鹿（White Tail Deer） |
沒有檢出 |
| 印度梅花鹿（Axis Deer） |
沒有檢出 |
| 火雞（Turkey） |
沒有檢出 |
| 鴕鳥（Ostrich） |
沒有檢出 |
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| Note：上述表格記載以外的物種沒進(jìn)行過確認(rèn)。 |
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京公網(wǎng)安備 110114000405號
