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機構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

無標題文檔                   
siRNA高效表達載體構(gòu)建

★ 構(gòu)建的同時可免費設(shè)計靶序列及其負對照的參考序列,節(jié)約您的設(shè)計實驗時間
★ 可信的測序結(jié)果,保證與目的序列一致,免除您的后顧之憂
通過構(gòu)建表達載體表達siRNA是多種siRNA制備方法中唯一有可能進行長期基因沉默研究的方法。我們可以根據(jù)您選定的siRNA序列,通過人工合成基因的方法將該序列克隆至Takara的pBAsi/pSINsi系列表達載體或Clontech的RNAi-Ready pSIREN系列表達載體中。您可以根據(jù)載體的特點及實驗的需要選擇其中任意一種載體進行構(gòu)建。
 
■ 載體信息
Takara pBAsi/pSINsi系列
NO. 載體名稱 長度(kb) 啟動子 特點 載體種類
1
pBAsi-hH1
2.8
 Human H1
使用RNA Polymerase III (pol III)類啟動子,既可以直接作為質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞瞬時表達siRNA,也可以將“啟動子*hairpin序列”切出后亞克隆至腺病毒載體,利用重組腺病毒進行siRNA的長期表達。          
質(zhì)粒表達載體
2
pBAsi-hU6
2.9
 Human U6
3
pBAsi-mU6
3.0
 Mouse U6
4
pSINsi-hH1
6.4
 Human H1
以復(fù)制缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒為基本骨架,使用RNA Polymerase III (pol III)類啟動子,既可以直接作為質(zhì)粒進行siRNA的瞬時表達,也可以包裝成重組逆轉(zhuǎn)錄病毒進行siRNA的長期表達。同時帶有真核篩選標記—新霉素基因。
逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體
5
pSINsi-hU6
6.5
 Human U6
6
pSINsi-mU6
6.6
 Mouse U6
 
Clontech RNAi-Ready pSIREN系列 (載體圖譜請登錄Clontech網(wǎng)站https://www.takarabio.com/ 查詢)
NO. 載體名稱 長度(kb) 啟動子 特點 載體種類
1
pSIREN-Shuttle
3.1

Human U6
可直接作為質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞,也可以將目的基因酶切后與腺病毒DNA連接,構(gòu)建腺病毒。
質(zhì)粒表達載體
2
pSIREN-RetroQ
6.4
可以進一步應(yīng)用于構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄病毒,通過與宿主細胞基因組DNA整合,實現(xiàn)siRNA在細胞內(nèi)長期穩(wěn)定表達。同時帶有真核篩選標記—嘌呤霉素抗性基因。
逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體
3
pSIREN-RetroQ
DsRed-Express
6.6
帶有紅色熒光蛋白標記,可直接觀察轉(zhuǎn)染效果。既可作為質(zhì)粒操作,也可以包裝成逆轉(zhuǎn)錄病毒進行操作。
4
pSIREN-RetroQ-
TetH
7.4
通過潮霉素抗性基因進行陽性克隆細胞篩選??膳cTet-on&Tet-off表達系統(tǒng)結(jié)合使用。
5
pSIREN-RetroQ-
TetP
6.6
通過嘌呤霉素抗性基因進行陽性克隆細胞篩選。可與Tet-on&Tet-off表達系統(tǒng)結(jié)合使用。
6
pSIREN-RetroQ-
ZsGreen
6.6
帶有綠色熒光蛋白標記,可直接觀察轉(zhuǎn)染效果。既可作為質(zhì)粒操作,也可以包裝成逆轉(zhuǎn)錄病毒進行操作。
 
■ 服務(wù)說明
1. 我們可以免費為您設(shè)計siRNA序列,您只需提供給我們靶基因序列或Gene ID即可。
2. 我們也可以使用其它公司的商品化siRNA表達載體為您進行siRNA表達載體構(gòu)建服務(wù)。需要您在提供線性化載體 (或質(zhì)粒載體) 的同時,提供詳細的載體背景資料。
3. 由于構(gòu)建的siRNA表達載體中插入的片段可以形成hairpin結(jié)構(gòu),因此可能會影響測序。如果我們對質(zhì)粒測序結(jié)果不理想時,將對由質(zhì)粒擴增得到的PCR產(chǎn)物進行測序。
4. 正常提供給您的質(zhì)粒為普通質(zhì)粒≥1 μg,如果您需要大量提取質(zhì)?;蛱崛o內(nèi)毒素質(zhì)粒,請另外填寫“Takara質(zhì)粒提取服務(wù)委托書”。
 
■ 價格·實驗周期
服務(wù)項目 收費標準 實驗周期
        一個siRNA表達載體構(gòu)建 1,500 元 10個工作日
        多個siRNA表達載體構(gòu)建 請垂詢  
 
■ 提供結(jié)果
電子版數(shù)據(jù) (包括PDF版實驗報告、測序彩色波形圖、測序方向圖、堿基序列圖、酶切位點圖等)、質(zhì)粒等。
 
如果您需要進行此項服務(wù),請?zhí)顚憽?/strong>Takara siRNA高效表達載體構(gòu)建服務(wù)委托書”(或請與本公司聯(lián)系索取)。填寫后通過傳真或E-mail發(fā)送給我們或當?shù)卮砩獭?/strong>
 
 

頁面更新:2023-05-26 10:45:09