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| Cas9蛋白質(zhì)檢測抗體 |
· 重組Cas9蛋白質(zhì)檢測用單克隆抗體/多克隆抗體
· 多克隆抗體可識別野生型Cas9蛋白質(zhì)和切口酶突變體（單克隆抗體還未進(jìn)行測驗(yàn)）
· 高特異性：檢測哺乳動物細(xì)胞裂解液樣品時(shí)背景很低
· 高靈敏度：這兩種抗體均可檢測低于1 ng的重組Cas9蛋白質(zhì)
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| ■ 產(chǎn)品說明： |
Takara Bio提供的單克隆抗體和多克隆抗體可用于檢測Streptococcus pyogenes來源的重組Cas9蛋白質(zhì)。
Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)是以Streptococcus pyogenes來源的全長重組Cas9蛋白質(zhì)為抗原，采用雜交瘤細(xì)胞制備生產(chǎn)的小鼠源抗體。用于Western blot檢測時(shí)，此抗體可以識別細(xì)菌和哺乳動物細(xì)胞裂解液樣品中低于1 ng的重組Cas9蛋白質(zhì)。
Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody是用于檢測Streptococcus pyogenes來源的重組Cas9蛋白質(zhì)的兔源抗體。此抗體可以識別Cas9核酸酶的3種突變體：野生型Cas9蛋白質(zhì)、Cas9切口酶和Cas9核酸酶-缺陷型突變體。此抗體具備高特異性和高靈敏度，檢測哺乳動物細(xì)胞樣品時(shí)其背景很低，用于Western blot檢測時(shí)可識別低至0.5 ng的重組Cas9蛋白質(zhì)。
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圖1． Western blot評估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody檢測靈敏度
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0.15-20.0 ng重組Cas9蛋白質(zhì)（rCas9）電泳后采用Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody(1:1,000稀釋)進(jìn)行Western Blot檢測。采用HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀釋）作為二抗，ECL作為檢測試劑。HT1080、HEK293細(xì)胞裂解液作為陰性對照。
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Lane 1：HT1080細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 6：rCas9 protein 1.25 ng
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Lane 2：HEK293細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 7：rCas9 protein 2.5 ng
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Lane 3：rCas9 protein 0.15 ng
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Lane 8：rCas9 protein 5.0 ng
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Lane 4：rCas9 protein 0.30 ng
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Lane 9：rCas9 protein 10.0 ng
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Lane 5：rCas9 protein 0.625 ng
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Lane 10：rCas9 protein 20.0 ng
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| 圖2．Western blot評估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody檢測特異性 |
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制備多種未轉(zhuǎn)染細(xì)胞和表達(dá)Cas9重組蛋白質(zhì)的HEK 293細(xì)胞（CMV啟動子）的細(xì)胞裂解液，以細(xì)胞裂解液為樣品通過Western blot方法評估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody檢測特異性。1 ng重組Cas9蛋白質(zhì)（rCas9）作為陽性對照。Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody (1:1,000稀釋)作為一抗，HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀釋）作為二抗，ECL作為檢測試劑。
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Lane 1：HepG2細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 8：裂解緩沖液
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Lane 2：CHO-K1細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 9：rCas9 protein 1 ng
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Lane 3：HeLa細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 10：Cas9表達(dá)HEK293細(xì)胞裂解液（2.0×103 cells）
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Lane 4：MCF7細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 11：Cas9表達(dá)HEK293細(xì)胞裂解液（5.0×103 cells）
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Lane 5：HEK293細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 12：Cas9表達(dá)HEK293細(xì)胞裂解液（1.0×104 cells）
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Lane 6：HT1080細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 13：Cas9表達(dá)HEK293細(xì)胞裂解液（1.5×104 cells）
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Lane 7：NIH3T3細(xì)胞裂解液（3.5×104 cells）
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| 圖3. Western blot評估Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1) 檢測靈敏度 |
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A. 1～5 ng重組Cas9蛋白質(zhì)(rCas9）電泳后采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀釋）進(jìn)行Western Blot檢測。HEK293細(xì)胞裂解液作為陰性對照。
B. 以表達(dá)Cas9重組蛋白質(zhì)的HEK 293細(xì)胞的細(xì)胞裂解液為樣品，采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀釋）進(jìn)行Western Blot檢測。HT1080、HEK293細(xì)胞裂解液作為陰性對照。
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| ■ 保存 |
－20℃
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| ■ 用途 |
| Western blot（1：1,000～1：5,000稀釋） |
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京公網(wǎng)安備 110114000405號
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