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產(chǎn)品選擇指南

技術服務信息

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Takara慢病毒滴度測定 10分鐘快速測定
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ￥5,970
Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ￥12,125
無標題文檔
 
 
慢病毒包裝系統(tǒng) → 293T包裝細胞 → 慢病毒滴度測定 → 慢病毒濃縮 → 慢病毒純化 → 轉導增強 → 整合位點檢測
 
 
10分鐘定量慢病毒滴度測試— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一種快速、簡便、有效的方法，可以在非常短的時間內檢測包裝細胞上清液中的慢病毒滴度。這種檢測方法包括將20 μl上清液添加到GoStix cassette中，等10分鐘以等待表明慢病毒p24蛋白質存在的條帶出現(xiàn)。我們早期的GoStix提供的是定性檢測結果，而升級后的Lenti-X GoStix Plus的檢測結果可以使用智能手機免費app進行分析，可以通過該應用程序比較條帶強度來量化慢病毒滴度。
 

重要提示：我們將于2020年9月26日（星期六）太平洋夏令時間凌晨3:00，也就是北京時間18:00，發(fā)布支持慢病毒滴度測定產(chǎn)品Lenti-X™ GoStix™ Plus的新版本移動應用程序。我們強烈建議所有用戶在上述發(fā)布日期之后，盡快更新為新版本。原因是：新版本GoStix Plus app一經(jīng)發(fā)布，舊版本app將不支持之前沒有檢測過的新批次Lenti-X GoStix Plus。請注意，app更新將導致原有保存測定結果從移動設備中刪除。因此，我們建議用戶在安裝新版本之前，確保所有測定結果均已保存或記錄。了解更多關于GoStix Plus app更新相關FAQ，請點擊此頁面查閱。

下載iOS版GoStix Plus應用程序，請登錄App Store搜索“GoStix Plus”獲??；下載安卓版GoStix Plus應用程序，請登錄Google Play商店搜索“GoStix Plus”獲取，也可以點擊此頁面下載


 
Lenti-X GoStix app的定量檢測結果（稱為GoStix值或GV）可用于比較不同包裝系統(tǒng)所產(chǎn)生的病毒量，其方式類似于ELISA方法，但比ELISA要更簡便和快捷得多，可借助參考病毒計算出實際的IFU/ml。訪問我們的FAQs頁面，了解如何下載和使用智能手機app的相關信息。通過簡便快速的慢病毒定量方式，Lenti-X GoStix Plus可以使您的轉導實驗方案差異更小化，確保每次實驗可以達到更為一致的轉導效果。
 
■ Overview
· 使用簡單的智能手機app在10分鐘內量化慢病毒滴度*
· 確定收集慢病毒上清液的理想時機
· 確保實驗達到一致的轉導效果
*最初的Lenti-X GoStix（Code No. 631243和631244）不能使用智能手機app進行慢病毒定量，并且該產(chǎn)品在逐步淘汰過程中。庫存銷售完畢后，將不再銷售這些產(chǎn)品。如果需要的話，Lenti-X GoStix Plus可以使用與原始Lenti-X GoStix相同的方式進行定性分析。
 
■ 應用
· 確定慢病毒包裝反應是成功的
· 比較不同包裝系統(tǒng)所產(chǎn)生的病毒量
 
■ 觀看視頻
Applying lentiviral supernatants
了解如何將樣品正確添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
 
■ 實驗例
圖1. 展示了慢病毒載體滴度測定的常用方法及其相關時間表（以小時為單位）。使用Lenti-X GoStix Plus進行滴度測定僅需要十分鐘，其測定時間遠遠短于傳統(tǒng)方法。Lenti-X GoStix Plus：一種基于側向層析技術的檢測方法，用于檢測上清液中的慢病毒p24衣殼蛋白質。qRT-PCR：通過qRT-PCR方法定量病毒RNA基因組。ELISA：檢測p24衣殼蛋白質的量。PCR：通過qPCR測定整合的DNA前病毒。IFU（FACS）：通過FACS分析RFP/GFP陽性細胞測定被感染靶細胞的百分比。IFU（篩選）：通過檢測轉導細胞群中抗藥細胞克隆的數(shù)量來確定感染單位。
 
圖2. p24的產(chǎn)生，GoStix值和IFU/ml值都取決于收獲病毒的時間。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指導制備ZsGreen1慢病毒一式兩份，并在指定時間收集病毒。在每個時間點，使用Lenti-X GoStix Plus分析樣品的GV值，使用HT1080細胞測定病毒稀釋液確定IFU/ml。檢測結果除了表明GV（i.e., p24積累）和IFU/ml取決于收獲時間之外，這些數(shù)據(jù)還表明GV和IFU/ml之間的比率隨時間的變化而變化。
 
圖3. 使用Lenti-X GoStix Plus測定的病毒滴度與不同濃度病毒的轉導滴度是有相關性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包裝系統(tǒng)制備Lenti-X ZsGreen1慢病毒。將制備出的病毒樣品進行梯度稀釋，添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中，進行密度分析測定滴度。另外，將每個梯度稀釋液使用HT1080細胞測定實際的IFU/ml。未知樣品的IFU/ml使用GV與IFU/ml的比值進行計算，該比值由使用與未知樣品相同的包裝系統(tǒng)和在相同的時間收集的參考病毒來確定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus測定并計算出的IFU/ml與實際IFU/ml作圖。
 
圖4. Lenti-X GoStix App通過測定測試（T）和對照（C）條帶的相對強度來定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手機相機確定測試（T）和對照（C）條帶的相對強度，并使用比率計算滴度。
 
圖5. 使用Lenti-X GoStix Plus測定的病毒滴度與不同包裝系統(tǒng)的轉導滴度是有相關性的。使用市面上銷售的三種不同的慢病毒載體和包裝系統(tǒng)制備ZsGreen1慢病毒。將所有制備樣品稀釋并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并進行分析。另外，將每個梯度稀釋液使用HT1080細胞測定實際的IFU/ml。使用與未知樣品相同的包裝系統(tǒng)和在相同的時間收集的參考病毒所確定的GV與IFU/ml的比值，計算每個未知樣品的IFU/ml。
 
圖6. 比較使用Lenti-X GoStix Plus測定的病毒滴度和基于ELISA方法測定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus測定的病毒滴度可以與基于ELISA方法測定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包裝系統(tǒng)制備Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080細胞測定轉導細胞的百分比（％轉導），然后進行FACS分析。此外，使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit測定病毒p24值，使用Lenti-X GoStix Plus確定GoStix值。以一定范圍MOIs的病毒轉導HT1080細胞，以其轉導效率和等同的ELISA和GoStix值作圖。轉導后48小時拍攝轉導細胞的熒光圖像。
 
 
 
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頁面更新：2023-07-26 15:27:49