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5’ …PumC(Nn)PumC…3’ |
*Pu: A or G, mC: 5-hydroxymethylcytosine, 5-methylcytosine, 4-methylcytosine, n=40-2,000
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■ 附帶試劑 |
10X McrBC Buffer |
500 μl |
0.1% BSA |
1 ml |
100 mM GTP(100 ×) |
50 μl |
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■ 制品說(shuō)明 |
McrBC是一種作用于含有甲基胞嘧啶DNA的特異性核酸內(nèi)切酶,不作用于非甲基化DNA。它能夠特異性地識(shí)別和切割包含兩個(gè)(G/A)mC間距在40 bp-2000 bp的DNA序列。(G/A)mC中的甲基化胞嘧啶可以是5-羥甲基胞嘧啶, 5-甲基胞嘧啶或4-甲基胞嘧啶。 |
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■ 起 源 |
大腸桿菌表達(dá)的重組體蛋白質(zhì)。 |
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■ 反應(yīng)溫度 |
37℃ |
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■ 活性確認(rèn) |
在50 μl反應(yīng)液中,37℃下反應(yīng)1小時(shí),將0.25 μg的含有單一McrBC酶切位點(diǎn)的線型pBR322 (pBR322-mu-BamH I-M Alu I) 完全分解,所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。 |
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■ 用途 |
DNA甲基化位點(diǎn)解析 (qAMP:應(yīng)用Real Time PCR方法定量解析DNA甲基化位點(diǎn)) 。
富集非甲基化DNA (CHARM:Comprehensive high-throughput arrays for relative methylation, Genome Res. 2008 May;18(5):780-90. Epub 2008 Mar 3.)
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