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■ 制品說明 |
iDimerize技術(shù)可以通過化學(xué)誘導(dǎo)DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域的二聚化來嚴(yán)格控制靶基因的轉(zhuǎn)錄激活。使用iDimerize方法用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控的一個關(guān)鍵優(yōu)勢是它的低背景,因為在添加二聚體配體之前,轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain, AD)是與DNA物理分離的。
轉(zhuǎn)錄因子是一種雙功能蛋白質(zhì),它可以識別靶基因附近的特定DNA序列(通過DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域),然后招募細胞的轉(zhuǎn)錄機制來激活轉(zhuǎn)錄過程(通過轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域)。雖然這兩個結(jié)構(gòu)域是作為單獨的蛋白質(zhì)表達并由A/C異源二聚體配體結(jié)合在一起的,但是它們?nèi)匀豢梢砸黄鸸ぷ鱽砑せ钷D(zhuǎn)錄過程。 |
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A/C Heterodimerizer Ligand |
A/C異源二聚體是一種人工合成的細胞滲透性配體,可用于誘導(dǎo)兩種融合蛋白質(zhì)的異源二聚化。例如,當(dāng)與本試劑盒(Code No. 635081)一起使用時,A/C異源二聚體可誘導(dǎo)DmrC標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄AD與DmrA標(biāo)記的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域發(fā)生二聚化反應(yīng)。 |
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調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程 |
依次轉(zhuǎn)染您感興趣的細胞:
1. 表達轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域和DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的質(zhì)粒(pHet-Act1-2)
2. 您感興趣的基因克隆在PZI-1可誘導(dǎo)啟動子的下游(pZFHD1-2) |
DNA結(jié)合部分始終與啟動子結(jié)合,但只有通過DmrA和DmrC結(jié)構(gòu)域與轉(zhuǎn)錄激活部分相互作用,才能激活轉(zhuǎn)錄。當(dāng)加入A/C異源二聚體時,兩種組分相互作用,您感興趣的基因就會從PZI-1啟動子轉(zhuǎn)錄出來。 |
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■ 制品特點 |
1. 應(yīng)用iDimerize技術(shù)嚴(yán)格調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程
2. 通過劑量依賴性小分子調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程
3. 在加入二聚體配體之前,激活結(jié)構(gòu)域與DNA物理分離,實現(xiàn)低背景 |
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■ 制品應(yīng)用 |
1. 以配體依賴的方式誘導(dǎo)基因表達
2. 分析促進細胞死亡、阻斷細胞周期或其他有毒的基因
3. 功能基因組學(xué)研究 |
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■ 保存 |
-20℃ |
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■ 參考文獻 |
Pomerantz, J. L., Sharp, P. A., & Pabo, C. O. Structure-based design of transcription factors. Science 267(5194), 93-96 (1995). |
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