T7 RNA Polymerase, HQ (high quality)是一種可用于基礎(chǔ)研究的產(chǎn)品，用于制備非臨床試驗的醫(yī)藥品原藥、開發(fā)符合GMP指南的醫(yī)藥品制造工藝以及開發(fā)RNA藥物等。本產(chǎn)品的終反應(yīng)液中，不含人或動物源性成分以及β內(nèi)酰胺類化合物。
本酶具有與T7 RNA Polymerase ver.2.0（Code No. 2541A）同等的性能，且能夠以含有T7啟動子序列的雙鏈DNA為模板，以NTP為基質(zhì)，通過轉(zhuǎn)錄啟動子下游區(qū)域，在體外合成單鏈RNA。與附帶的反應(yīng)緩沖液（10X IVT Reaction Buffer, HQ）配合使用時，可大量制備高質(zhì)量的RNA，適用于RNA醫(yī)藥領(lǐng)域的研發(fā)。
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| ■ HQ級別品質(zhì) |
| 本產(chǎn)品的終反應(yīng)液中，不含人或動物源性成分以及β內(nèi)酰胺類化合物。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase |
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| ■ 性質(zhì) |
1. 分子量：約99.8 kDa
2. 輔因子：Mg2+
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| ■ 活性定義 |
| 在37℃條件下，1小時內(nèi)生成0.5μg的1.9kb FLuc RNA所需的酶量定義為1個活性單位（U）。 |
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| ■ 用途 |
1. 合成RNA，用于酶的帶帽結(jié)構(gòu)
2．合成基于Cap analog帶帽結(jié)構(gòu)的mRNA
3．長鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA）的合成
4．向?qū)NA（guide RNA）的合成
5．siRNA前體的合成
6．用于RT-qPCR的RNA標準模板的合成
7．高特異性RNA探針的合成
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| ■ 使用注意 |
1. 請勿劇烈攪拌本酶。
2. 當dsDNA模板、試劑、試管或微量移液器槍頭被RNase污染時，合成的RNA產(chǎn)量會降低或者出現(xiàn)片段化。在實驗過程中應(yīng)采取預(yù)防措施以避免RNase污染，例如戴一次性手套和使用專門用于RNA實驗的試管和微量移液器槍頭。
3. 為合成長度均等的RNA，可將含有T7啟動子的線性化質(zhì)粒或PCR產(chǎn)物等作為DNA模板來使用。理想的線性化模板末端應(yīng)為5’-突出或平端。
4. 高質(zhì)量10×IVT Reaction Buffer含有亞精胺。亞精胺與核酸形成復(fù)合體，在某些情況下可能產(chǎn)生沉淀，因此模板DNA應(yīng)在加酶之前即倒數(shù)第二步再加入反應(yīng)體系中。
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