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機(jī)構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

Q-1:什么是Mate&Plate文庫?
A-1:

Mate&Plate文庫是用于酵母雙雜交篩選的已經(jīng)將文庫轉(zhuǎn)化到MATα型單倍體酵母菌株(Y187)中的預(yù)分裝文庫。通過與表達(dá)bait的MATa型酵母雙雜報(bào)告菌株(Y2HGold和AH109)接合及涂板的方法即可篩選陽性克隆。實(shí)驗(yàn)時(shí)只要將Y2HGold bait菌株采用SD/-Trp培養(yǎng)基過夜培養(yǎng)16-20小時(shí)使其OD600≥0.8,第二天將該菌液與滴度滿足要求的1管文庫混合,繼續(xù)過夜培養(yǎng)20-24小時(shí)使兩種酵母菌接合形成二倍體后將二倍體細(xì)胞涂布在SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal/AbA的平板上篩選陽性互作克隆即可。

Q-2:如何自己制備文庫?
A-2:

強(qiáng)烈推薦使用Make your Own“Mate & Plate” Library System(制品Code:630490)自己構(gòu)建文庫。Mate&Plate方法是最簡單的酵母雙雜交文庫構(gòu)建方法和最容易的篩選方法。

Q-3:如何判斷現(xiàn)有的文庫是否可以用于Matchmaker Gold?
A-3:

   Clontech沒有驗(yàn)證其他來源的酵母雙雜交文庫,但是,原則上任意文庫/prey載體在滿足以下條件
   下,都可以用于Matchmker Gold:
   · 兼容S. cerevisiae;
   · 帶有GAL4轉(zhuǎn)錄激活域;
   · 可以采用LEU2標(biāo)記進(jìn)行篩選。

頁面更新:2018-10-23 09:40:04