RNA極易分解,應(yīng)嚴格防止核酸分解酶的混入。實驗操作時應(yīng)戴手套,實驗的儀器及溶液應(yīng)經(jīng)DEPC處理。操作不嚴謹會造成RNA降解,導(dǎo)致RNA Marker中的條帶不清晰或不完整。
使用14-30 ssRNA Ladder Marker時應(yīng)注意如下事項:
1. 為了避免反復(fù)凍融,開封后請把制品分成小包裝保存。
2. 請不要事先把RNA Loading Buffer和6×Dye加入到Marker中后進行保存。
3. Marker使用后應(yīng)立即-80℃保存。
4. 為了避免RNase的污染,實驗應(yīng)在RNA實驗區(qū)進行,并要保證實驗器具和操作符合RNA操作要求。
5. 請使用15% Acrylamide:bisacrylamide(19:1)/7 M Urea/0.5×TBE凝膠進行電泳。其他條件下的電泳條帶有可能不能完全分開。
6. ssRNA實驗樣品序列和實驗樣品上樣量的不同,顯示的片段大小有可能會有微弱的差別。
使用RNA Marker RL1,000/RL6,000/RL10,000時應(yīng)注意如下事項:
1. RNA極易分解,應(yīng)嚴格防止核酸分解酶的混入。實驗操作時應(yīng)戴手套,實驗的儀器及溶液應(yīng)經(jīng)DEPC處理。操作不嚴謹會造成RNA降解,導(dǎo)致RNA Marker中的條帶不清晰或不完整。
2. RNA Marker中的RNA為單鏈線性RNA,因此,當(dāng)進行體外轉(zhuǎn)錄得到的RNA或經(jīng)提取得到的mRNA等單鏈線性RNA電泳時,可使用本制品作為分子量大小的參照標(biāo)準(zhǔn),但對于Total RNA,本Marker只能作為定性參照標(biāo)準(zhǔn)。
3. 若脫色后觀察不到Marker的條帶,可能是由于膠被染上了較高的背景,此時可以進行反復(fù)脫色或過夜脫色后再進行觀察。
頁面更新:2020-05-11 14:22:06