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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)資料 > 相關(guān)問答 > Takara > 核酸提取純化及DNA標(biāo)記 > TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0
Q-1:純化DNA時(shí),一般使用多少洗脫液洗脫?
A-1:

可以根據(jù)所需濃度計(jì)算使用洗脫液的體積,一般情況下,洗脫液體積大于30 μl即可洗脫Column中90%以上的DNA,所以洗脫液體積最好大于30 μl,當(dāng)對DNA濃度要求較高時(shí),也可以減少洗脫液體積至20 μl,但回收率會略有下降,應(yīng)注意使用預(yù)熱的洗脫液洗脫,并在洗脫離心之前靜置1分鐘以上,以增加洗脫效率。

Q-2:本試劑盒一次可以回收的DNA量的范圍是多少?
A-2:

本試劑盒中Column一次回收的最大吸附量可達(dá)20 μg以上,最小DNA起始量也可低至500 ng所以使用前請對DNA樣品的總量進(jìn)行估算。

Q-3:DNA的收量較低,為什么?
A-3:

一般情況下,DNA的回收率可以達(dá)到70-95%。DNA收量較低時(shí),可以從以下幾個方面考慮:
① 使用前確認(rèn)Buffer WB中是否加入了指定體積的乙醇。
② 洗脫前的空離步驟不可省略,此步驟可以除去Column上殘留的洗液中的乙醇,否則影響洗脫效率。
③ 洗脫時(shí)將滅菌蒸餾水或Elution Buffer加熱至60℃后使用有利于提高洗脫效率。

Q-4:純化得到的DNA反應(yīng)性能不佳(酶切、連接),為什么?
A-4:

① 洗脫液中殘留部分鹽離子,加入Buffer WB后室溫靜置5分鐘,有助于徹底清洗掉Column上殘留的鹽離子。
② 洗脫液中殘留乙醇,在向Column中加入洗脫液之前,將Column在室溫下靜置2分鐘有助于使Column上殘留的乙醇徹底揮發(fā),然后再加入洗脫液洗脫。
③ 進(jìn)行DNA洗脫時(shí)用滅菌蒸餾水洗脫。

頁面更新:2020-04-28 14:54:48