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機構(gòu)用戶解決方案

Q-2：TaKaRa DEXPAT Easy能否用于非石蠟包埋切片DNA的回收?: A-2：
能用于冷凍切片的回收，但脫完蠟的切片的DNA提取尚未進行實驗確認。

Q-3：TaKaRa DEXPAT Easy能否從固定于載玻片上的組織中提取DNA?: A-3：
把固定于載玻片上的組織從載玻片上刮離、或者用二甲苯進行剝離后，將無法回收DNA。此時可以使用限定部位法（參考說明書中的“操作方法”Ⅱ）進行DNA回收。但是經(jīng)染色后的組織材料，其染色劑對PCR反應(yīng)有阻礙作用，應(yīng)十分注意。

Q-4：TaKaRa DEXPAT Easy回收的DNA能否用分光光度計進行定量?: A-4：
DEXPAT不是核酸純化試劑，是DNA的回收試劑，因此不建議用UV分光光度計進行DNA定量。

Q-7：TaKaRa DEXPAT Easy按照說明書操作，加熱后離心不能形成水層，此時應(yīng)注意什么?: A-7：
可能是使用的切片過大，請從以下幾方面加以考慮。
① 減少切片量。
② 提高離心轉(zhuǎn)速。（使用離心機的最大轉(zhuǎn)速進行離心。）
③ 加熱時進行攪拌，使TaKaRa DEXPAT Easy很好混合。
④ 離心時如不十分冷卻，10分鐘離心將無法得到固化的石蠟薄膜，此時請延長離心時間或減少樣品加量。

Q-8：TaKaRa DEXPAT Easy回收的DNA用TaKaRa Ex Taq進行PCR反應(yīng)，不能擴增目的DNA片段，此時應(yīng)注意什么?: A-8：
① 可能混有PCR擴增的抑制劑。請嘗試使用抗阻害性強的MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 (Code No. R071A/B)、MightyAmp DNA Polymerase Ver.3 (Code No. R076A/B)或 PrimeSTAR GXL DNA Polymerase（Code No. R050A/B）進行PCR反應(yīng)。使用PrimeSTAR GXL時，DNA溶液加入量不要超過PCR反應(yīng)體積的1/10（V/V）量。使用MightyAmp DNA Polymerase時，DNA溶液加入量不要超過PCR反應(yīng)體積的4/10（V/V）量。
② 目的基因表達量低或者由于包埋、固定的處理使DNA損傷比較嚴重。這種情況推薦增加DNA溶液加入量，使用MightyAmp DNA Polymerase進行擴增。 NOTE：使用TaKaRa Ex Taq等普通PCR聚合酶時，DNA溶液加入量不能超過PCR反應(yīng)總體積的1/10。通過乙醇沉淀進行純化的DNA可除去抑制劑，提高DNA有效模板量。使用MightyAmp DNA Polymerase進行PCR反應(yīng)時，DNA的加入量為PCR反應(yīng)總體積的4/10，也可得到良好的擴增。一般情況下，使用普通PCR聚合酶進行擴增時，請對DNA溶液進行乙醇沉淀后再進行PCR反應(yīng)。

頁面更新：2020-04-30 09:42:10