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機(jī)構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

Q-1：Yeast Protein Extraction Reagent是否對(duì)所有酵母菌都適用?
A-1：

一般情況下，Yeast Protein Extraction Reagent適用于所有對(duì)酵母菌破壁酶敏感的酵母菌細(xì)胞的Protein提取。我們使用本制品對(duì)Pichia（GS115、X33）、Saccharomyces（Y187、AH109）以及Candida（Tropicalis）進(jìn)行了蛋白質(zhì)的成功提取。下表是文獻(xiàn)中報(bào)道的利用Yeast Protein Extraction Reagent能夠成功裂解酵母菌細(xì)胞壁的菌種一覽表。

 
 菌 種 名 稱
 1. Shizosaccharomyces  10. Graphiola phoenicis
 2. Saccharomyces cerevisiae  11. Brettanomyces bruxellensis
 3. Hansenula marakii  12. Candida colliculosa
 4. Kluyveromyces lactis  13. Tremella mesenterica
 5. Pichia anomala  14. Candida utilis
 6. Lipomyces starkeyi  15. Kloeckera apiculata
 7. Filobasidium floriforme  16. Trigonopsis variabilis
 8. Ustilago maydis  17. Cryptococcus albidus
 9. Rhodosporidium toruloides  18. Phaffia rhodozyma
 
Q-2：細(xì)胞不能完全裂解?
A-2：

細(xì)胞數(shù)量太多會(huì)導(dǎo)致裂解液不能完全裂解細(xì)胞。如果初始加入的細(xì)胞過多會(huì)使反應(yīng)液變得十分粘稠，而細(xì)胞則會(huì)聚集成團(tuán)，使裂解作用不充分。在此種情況下可以將Yeast Protein Extraction Reagent的量加倍，以達(dá)到完全裂解的效果。

Q-3：蛋白質(zhì)提取量較低，怎么辦?
A-3：

① 細(xì)胞未能完全裂解。一般來說，每25 μl的Yeast Protein Extraction Reagent可以對(duì)1～5×106的細(xì)胞進(jìn)行裂解，得到約2.5 mg/ml的酵母菌蛋白質(zhì)。如果加入的細(xì)胞數(shù)量過多，會(huì)造成蛋白質(zhì)提取量下降。如果菌體量增加，請(qǐng)相應(yīng)增加裂解用的Yeast Protein Extraction Reagent的使用量。
② 菌體不新鮮。提取用菌體的OD600值超過對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期會(huì)造成提取蛋白質(zhì)的量和質(zhì)發(fā)生變化，一般建議在酵母菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)收集菌體，進(jìn)行蛋白質(zhì)提取，此時(shí)效果較佳。

頁(yè)面更新：2020-05-11 14:39:35