一般情況下組織或細胞中所能提取的Small RNA量如下表（表中所指提取量指提取得到的Small RNA fragments進行OD定量的結果，其提取量并不代表miRNA含量，且不同組織來源的Small RNA含量差別較大）：
| 組織材料 | 起始樣品量 | Small RNA提取量 |
| 肝臟 | 100 mg | 約50 μg |
| HL-60培養(yǎng)細胞 | 1×107 個 | 約15 μg |
| 骨骼肌 | 100 mg | 約15 μg |
260 nm、320 nm、230 nm、280 nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白質等有機物的吸光度值。OD260/OD280（R）體現了RNA中的蛋白質等有機物的污染程度，質量較好的RNA的R值應在1.8～2.2之間，當R<1.8時，溶液中的蛋白質等有機物的污染比較明顯；當R>2.2時，說明RNA已經被水解成了單核苷酸。
在對核酸進行吸光度檢測時，需要注意稀釋液應使用TE Buffer。
RNA濃度=（OD260-OD320）×稀釋倍數×0.04 μg/μl。
① 向組織材料中加入RNAiso for Small RNA后，請充分研磨勻漿使其充分裂解。
② 相分離后請盡量完全回收上清液。
③ 增加起始組織加量，并成比例添加RNAiso for Small RNA。
① 75%乙醇清洗沉淀后不要干燥時間過長或加熱干燥。
② 可以于60℃加熱5分鐘后再于冰上溶解數小時。
③ RNA沉淀中含有不溶的蛋白質混合物時，應注意在相分離后吸取上清液時，避免槍頭接觸蛋白層。
④ 溶解液更換為0.5%的SDS溶液（DEPC處理水配制）。
① RNA應使用TE Buffer稀釋后再進行吸光度值的測定，低離子強度或低pH值會使OD280值升高。
② 樣品裂解時加入的RNAiso for Small RNA量偏少，造成蛋白質變性不充分，可以再次對Small RNA溶液進行苯酚/氯仿抽提，以除去蛋白質。
③ 含有裂解液的樣品經勻漿混勻后未在室溫靜置，或靜置的時間不足5分鐘。
④ 相分離后，吸取上清液時不小心接觸蛋白層造成污染。
⑤ RNA未充分溶解。
① 使用的組織材料不夠新鮮。提取RNA的組織材料應采用新鮮的組織材料，或將新鮮的組織材料用液氮迅速冷凍后置于-80℃保存。
② 提取RNA時使用的試劑及器材中混有RNA分解酶。
③ 提取的組織材料中含有大量的RNA分解酶，而RNAiso for Small RNA的添加量不夠。
① 裂解組織或細胞使用的RNAiso for Small RNA量偏少。
② 使用的組織材料中含有大量的有機溶劑（如：乙醇、異丙醇等）、高濃度的Buffer、堿性溶劑等。
③ 如果提取的RNA中含有DNA時，可以使用Recombinant DNase I（RNase-free）(Code No. 2270A）進行DNA消化。
頁面更新：2020-05-12 13:06:50
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