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產(chǎn)品選擇指南

技術服務信息

當前位置：首頁 > 技術資料 > 相關問答 > Takara > 核酸提取純化及DNA標記 > TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0
Q-1：純化DNA時，一般使用多少洗脫液洗脫?
A-1：

可以根據(jù)所需濃度計算使用洗脫液的體積，一般情況下，洗脫液體積大于30 μl即可洗脫Column中90%以上的DNA，所以洗脫液體積最好大于30 μl，當對DNA濃度要求較高時，也可以減少洗脫液體積至20 μl，但回收率會略有下降，應注意使用預熱的洗脫液洗脫，并在洗脫離心之前靜置1分鐘以上，以增加洗脫效率。

Q-2：本試劑盒一次可以回收的DNA量的范圍是多少?
A-2：

本試劑盒中Column一次回收的最大吸附量可達20 μg以上，最小DNA起始量也可低至500 ng所以使用前請對DNA樣品的總量進行估算。

Q-3：DNA的收量較低，為什么?
A-3：

一般情況下，DNA的回收率可以達到70-95%。DNA收量較低時，可以從以下幾個方面考慮：
① 使用前確認Buffer WB中是否加入了指定體積的乙醇。
② 洗脫前的空離步驟不可省略，此步驟可以除去Column上殘留的洗液中的乙醇，否則影響洗脫效率。
③ 洗脫時將滅菌蒸餾水或Elution Buffer加熱至60℃后使用有利于提高洗脫效率。

Q-4：純化得到的DNA反應性能不佳（酶切、連接），為什么?
A-4：

① 洗脫液中殘留部分鹽離子，加入Buffer WB后室溫靜置5分鐘，有助于徹底清洗掉Column上殘留的鹽離子。
② 洗脫液中殘留乙醇，在向Column中加入洗脫液之前，將Column在室溫下靜置2分鐘有助于使Column上殘留的乙醇徹底揮發(fā)，然后再加入洗脫液洗脫。
③ 進行DNA洗脫時用滅菌蒸餾水洗脫。

頁面更新：2020-04-28 14:54:48