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技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置：首頁 > 技術(shù)資料 > 相關(guān)問答 > Takara > 核酸提取純化及DNA標(biāo)記 > TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit
Q-1：使用TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit提取的基因組DNA的收量如何?
A-1：

本試劑盒適合于植物材料基因組DNA的提取?；蚪MDNA的提取量因材料不同而各異，一般情況下，從100 mg的植物材料中，可以提取約1～10 μg的基因組DNA。植物材料的DNA含量一般較低，尤其是含水分較多的植物果實(shí)及生長(zhǎng)狀況較老的葉片。幼嫩的植物葉苗及植物種子中基因組DNA含量相對(duì)豐富，且植物的DNA含量和植物的生長(zhǎng)狀態(tài)有很大關(guān)系，如果想要獲得高品質(zhì)的DNA請(qǐng)使用幼嫩的植物材料，否則可能得不到完整的DNA。

Q-2：使用TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit提取的基因組DNA的收量較低或無基因組DNA，為什么?
A-2：

基因組DNA收量較低時(shí)，可以從以下幾個(gè)方面考慮：
1．實(shí)驗(yàn)材料本身DNA含量低，比如從100 mg蘋果果肉中僅能提取得到約幾十納克的基因組DNA；
2．液氮研磨不充分，DNA未充分釋放。植物材料是需要進(jìn)行液氮研磨的，所以充分的液氮研磨是獲得高品質(zhì)DNA的關(guān)鍵；
3．選材不當(dāng)，處于生長(zhǎng)中期或末期的植物材料DNA含量較低，甚至是不完整的DNA；
4．洗脫時(shí)將滅菌蒸餾水或Elution Buffer加熱至65℃后使用將有利于提高洗脫效率；
5．請(qǐng)嚴(yán)格按照操作方法進(jìn)行操作。

Q-3：使用TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit提取的基因組DNA有降解，為什么?
A-3：

1．材料不夠新鮮，收集后的材料未及時(shí)處理或未低溫保存。我們建議材料應(yīng)盡量在-80℃保存，運(yùn)輸過程中亦應(yīng)使用干冰等。
2．材料本身有殘留的DNA酶活性?？梢栽黾右淮蜝uffer WA的清洗操作。
3．如需長(zhǎng)期保存提取的DNA，請(qǐng)使用Elution Buffer洗脫。

Q-4：使用TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit提取的基因組DNA中有RNA污染，為什么?
A-4：

1．實(shí)驗(yàn)過程中沒有使用RNase A。應(yīng)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作要求使用RNase A。
2．RNase A可能失活。RNase A盡可能在-20℃下保存，RNase A活性比較穩(wěn)定，一般不易失活。

Q-5：使用TaKaRa MiniBEST Plant Genomic DNA Extraction Kit提取的基因組DNA反應(yīng)性能差，為什么?
A-5：

1．提取的基因組DNA中鹽份濃度過高。在使用Buffer WA和Buffer WB進(jìn)行DNA制備膜的清洗時(shí)，請(qǐng)沿Spin Column的管壁四周加入，有助于徹底清洗掉Column上殘留的鹽離子，這樣有利于提高清洗效果。
2．洗脫液中殘留乙醇，在向Spin Column中加入洗脫液之前，將Spin Column在室溫下靜置2分鐘有助于使Spin Column上殘留的乙醇徹底揮發(fā)，然后再加入洗脫液洗脫。
3．進(jìn)行DNA洗脫時(shí)請(qǐng)一定在膜的中央加入洗脫液，盡量不要沾染Spin Column的管壁四周。

頁面更新：2020-04-29 14:44:36