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機(jī)構(gòu)用戶解決方案

Q-1：DNA收量低、回收不到基因組DNA，怎么辦?: A-1：
可以參考以下建議進(jìn)行改善：
1．由于植物組織的不同，基因組DNA回收量會(huì)有所不同，請(qǐng)?jiān)黾映跏冀M織量。
2．松、山茶等固體葉片可以使用液氮研磨后再提取基因組DNA。
3．使用Microtube用研磨棒代替Pipet Tip進(jìn)行按壓處理可能會(huì)提高收量。
4．添加異丙醇或者70％乙醇后的離心時(shí)間延長（添加異丙醇后的離心時(shí)間10分鐘→30分鐘、添加70％乙醇后的離心時(shí)間3分鐘→30分鐘等），可能會(huì)提高收量。
5．根據(jù)植物組織的保存時(shí)間、保存條件的不同，基因組DNA收量會(huì)有所不同，請(qǐng)盡量使用新鮮樣品。

Q-2：PCR無擴(kuò)增產(chǎn)物，怎么辦?: A-2：
可以參考以下建議進(jìn)行改善：
1．有時(shí)回收的基因組DNA溶液中含有PCR反應(yīng)的阻害物質(zhì)，請(qǐng)將基因組DNA溶液進(jìn)行稀釋后再作為PCR反應(yīng)的模板使用。
2．初始組織量太多，請(qǐng)減少初始組織量。
3．基因組DNA溶液呈茶褐色時(shí)，可能混入了明膠類物質(zhì)，使用High-Salt Solution for Precipitation（Plant）（Code No. 9193）處理可能將緩和對(duì)PCR反應(yīng)的阻害。使用High-Salt Solution for Precipitation（Plant）處理基因組DNA樣品時(shí)，操作方法與處理RNA樣品相同。但是不含PCR反應(yīng)阻害物質(zhì)的樣品如果使用High-Salt Solution for Precipitation（Plant）處理后，相反有可能會(huì)引起對(duì)PCR反應(yīng)的阻害，請(qǐng)注意！
4．PCR反應(yīng)用酶選擇TaKaRa Ex Taq^® Hot Start Version（Code No. RR006）。

Q-3：提取的基因組DNA中混入了大量的RNA，怎么辦?: A-3：
使用本產(chǎn)品時(shí)，有可能存在RNA污染，此時(shí)推薦使用RNase處理。
RNase處理方法：
1、向DNA溶液中加入終濃度為10-20 μg/ml的RNase A^*
2、37℃保溫30分鐘 3、如有必要，可用酚/氯仿抽提。
*：RNase A粉末需用10 mM Tris-HCl pH7.5和15 mM NaCl配置成1 mg/ml的溶液。若含有DNase，100℃加熱15分鐘使DNase失活（無DNase的RNase A溶液可購買）。

頁面更新：2020-04-29 15:17:35