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機(jī)構(gòu)用戶(hù)解決方案

Q-1：TaKaRa DEXPAT Easy能否進(jìn)行RNA回收?: A-1：
本制品是DNA回收專(zhuān)用試劑，不能進(jìn)行RNA回收。

Q-2：TaKaRa DEXPAT Easy能否用于非石蠟包埋切片DNA的回收?: A-2：
能用于冷凍切片的回收，但脫完蠟的切片的DNA提取尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。

Q-3：TaKaRa DEXPAT Easy能否從固定于載玻片上的組織中提取DNA?: A-3：
把固定于載玻片上的組織從載玻片上刮離、或者用二甲苯進(jìn)行剝離后，將無(wú)法回收DNA。此時(shí)可以使用限定部位法（參考說(shuō)明書(shū)中的“操作方法”Ⅱ）進(jìn)行DNA回收。但是經(jīng)染色后的組織材料，其染色劑對(duì)PCR反應(yīng)有阻礙作用，應(yīng)十分注意。

Q-4：TaKaRa DEXPAT Easy回收的DNA能否用分光光度計(jì)進(jìn)行定量?: A-4：
DEXPAT不是核酸純化試劑，是DNA的回收試劑，因此不建議用UV分光光度計(jì)進(jìn)行DNA定量。

Q-5：TaKaRa DEXPAT Easy回收的DNA是否可以通過(guò)電泳進(jìn)行確認(rèn)?: A-5：
因回收DNA量少，往往不能用電泳進(jìn)行確認(rèn)。

Q-7：TaKaRa DEXPAT Easy按照說(shuō)明書(shū)操作，加熱后離心不能形成水層，此時(shí)應(yīng)注意什么?: A-7：
可能是使用的切片過(guò)大，請(qǐng)從以下幾方面加以考慮。
① 減少切片量。
② 提高離心轉(zhuǎn)速。（使用離心機(jī)的最大轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。）
③ 加熱時(shí)進(jìn)行攪拌，使TaKaRa DEXPAT Easy很好混合。
④ 離心時(shí)如不十分冷卻，10分鐘離心將無(wú)法得到固化的石蠟薄膜，此時(shí)請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或減少樣品加量。

Q-8：TaKaRa DEXPAT Easy回收的DNA用TaKaRa Ex Taq進(jìn)行PCR反應(yīng)，不能擴(kuò)增目的DNA片段，此時(shí)應(yīng)注意什么?: A-8：
① 可能混有PCR擴(kuò)增的抑制劑。請(qǐng)嘗試使用抗阻害性強(qiáng)的MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 (Code No. R071A/B)、MightyAmp DNA Polymerase Ver.3 (Code No. R076A/B)或 PrimeSTAR GXL DNA Polymerase（Code No. R050A/B）進(jìn)行PCR反應(yīng)。使用PrimeSTAR GXL時(shí)，DNA溶液加入量不要超過(guò)PCR反應(yīng)體積的1/10（V/V）量。使用MightyAmp DNA Polymerase時(shí)，DNA溶液加入量不要超過(guò)PCR反應(yīng)體積的4/10（V/V）量。
② 目的基因表達(dá)量低或者由于包埋、固定的處理使DNA損傷比較嚴(yán)重。這種情況推薦增加DNA溶液加入量，使用MightyAmp DNA Polymerase進(jìn)行擴(kuò)增。 NOTE：使用TaKaRa Ex Taq等普通PCR聚合酶時(shí)，DNA溶液加入量不能超過(guò)PCR反應(yīng)總體積的1/10。通過(guò)乙醇沉淀進(jìn)行純化的DNA可除去抑制劑，提高DNA有效模板量。使用MightyAmp DNA Polymerase進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)，DNA的加入量為PCR反應(yīng)總體積的4/10，也可得到良好的擴(kuò)增。一般情況下，使用普通PCR聚合酶進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，請(qǐng)對(duì)DNA溶液進(jìn)行乙醇沉淀后再進(jìn)行PCR反應(yīng)。

頁(yè)面更新：2020-04-30 09:42:10