| TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase |
| 可與In-Fusion試劑盒組合，簡(jiǎn)單高效的進(jìn)行克隆 |
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| 使用TaKaRa Ex Priemier DNA Polymerase（不添加色素/添加色素）擴(kuò)增后的PCR產(chǎn)物（平滑末端）和線性化質(zhì)粒載體，使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix進(jìn)行克隆后，確認(rèn)目的克隆的獲取效率。需要插入的PCR產(chǎn)物末端設(shè)計(jì)了與線狀化質(zhì)粒載體末端具有15 bp的同源序列。此外，在In-Fusion反應(yīng)時(shí)，使用Cloning Enhance，PCR產(chǎn)物無需再進(jìn)行單獨(dú)的純化流程。 |
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| ＜In-Fusion克隆流程＞ |
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| 1）通過EX Premier（無色素版本/有色素版本）擴(kuò)增各種目的基因 |
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| 使用TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase對(duì)11種目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，之后通過電泳確認(rèn)，所有的目的基因都沒有檢測(cè)到非特異性擴(kuò)增，可以使用Clonning Enhance進(jìn)行純化。使用Cloning Enhance，PCR產(chǎn)物無需再進(jìn)行單獨(dú)的純化流程，可以簡(jiǎn)單且放心地進(jìn)行In-Fusion反應(yīng)。 |
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| 2）EX Premier（無色素版本/有色素版本）擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物的克隆結(jié)果 |
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| 1）中擴(kuò)增的目的基因，使用了來自PLN和GATA4的PCR產(chǎn)物進(jìn)行In-Fusion克隆，隨機(jī)選取了5個(gè)大腸桿菌菌落，使用PCR方法，對(duì)插入片段進(jìn)行確認(rèn)。無論不含色素酶還是含色素酶，全部確認(rèn)有目的基因插入。 |
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