Cellartis®干細(xì)胞研究用系列產(chǎn)品介紹之 |
不依賴LIF的小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基:GS2-M |
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小鼠胚胎干細(xì)胞是首個(gè)被體外分離培養(yǎng)并建系的干細(xì)胞,目前其相關(guān)研究已經(jīng)比較完善并投入到了實(shí)際應(yīng)用中,很多其他種屬的干細(xì)胞研究也都會(huì)參考小鼠胚胎干細(xì)胞的研究成果。一個(gè)好的小鼠胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,需要同時(shí)滿足操作簡(jiǎn)便、結(jié)果穩(wěn)定、增長(zhǎng)迅速、可重復(fù)性好、有效維持胚胎干細(xì)胞處于Ground-state等特點(diǎn)。
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Cellartis 提供一款小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基GS2‐M,其成分確定、無血清,支持無飼養(yǎng)層培養(yǎng),通過添加兩種特別的小分子抑制劑(CHIR99021,PD0325901=2i)來阻斷分化信號(hào)通路GSK3β和 ERK/MEK,進(jìn)而維持小鼠胚胎干細(xì)胞處于Ground state。值得一提的是,使用GS2-M培養(yǎng)基培養(yǎng)的小鼠胚胎干細(xì)胞,與添加血清和LIF的培養(yǎng)基培養(yǎng)相比,可以更好地維持小鼠胚胎干細(xì)胞處于Ground-state。 |
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1.GS2-M培養(yǎng)基特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì) |
特點(diǎn) |
優(yōu)勢(shì) |
由Dr.Austin Smith研發(fā) |
在很多雜志上發(fā)表,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可信,可放心使用 |
成分確定、無血清 |
批次間一致,無需擔(dān)心批次間差異 |
無飼養(yǎng)層培養(yǎng) |
不需要準(zhǔn)備飼養(yǎng)層細(xì)胞,
節(jié)省了準(zhǔn)備飼養(yǎng)層細(xì)胞的時(shí)間和精力 |
使用GSK3β和 ERK/MEK抑制劑 |
維持細(xì)胞處于強(qiáng)的Ground state,
有效制備嵌合體小鼠,形成生殖系傳遞。 |
不添加LIF也可以發(fā)揮作用 |
組分簡(jiǎn)單,不需要額外購(gòu)買LIF,
更易于準(zhǔn)備完全培養(yǎng)基,節(jié)省了LIF的費(fèi)用 |
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2.GS2-M利于維持小鼠胚胎干細(xì)胞處于Ground-state |
Ground state標(biāo)志基因Rex1和下游綠色熒光蛋白質(zhì)基因GFP插入的小鼠胚胎干細(xì)胞株(Rex1GFPd2),分別使用GS2-M培養(yǎng)基和添加血清&LIF培養(yǎng)基(10%FBS/GMEM+LIF)培養(yǎng)3代,通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)并分析Rex1-GFP表達(dá)情況,如下圖所示,不添加LIF的GS2-M培養(yǎng)基培養(yǎng)的小鼠胚胎干細(xì)胞陽性率高于70%,更有利于維持小鼠胚胎干細(xì)胞處于Ground-state(參考文獻(xiàn):Nat. Cell Biol. (2011) 13, 838-845)。 |
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(圖片來源于Takara Bio Inc.) |
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3.GS2-M培養(yǎng)的小鼠干細(xì)胞可以高效制備嵌合體小鼠 |
來源于黑色毛小鼠的胚胎干細(xì)胞使用GS2-M培養(yǎng)基培養(yǎng)1周后,注射入白色毛小鼠囊胚,根據(jù)毛色可以判斷嵌合體小鼠的效率,如下圖所示,新生小鼠呈現(xiàn)100%黑色毛,證實(shí)GS2-M可以高效制備嵌合體小鼠(本數(shù)據(jù)由新潟大學(xué)腦研究所的崎村建司先生和阿部學(xué)先生提供)。 |
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(圖片來源于Takara Bio Inc.) |
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GS2-M產(chǎn)品信息: |
http://grayarearadio.com/ProductShow.aspx?m=20160307140053500605&productID=20160
307143504920625 |
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