酵母雜交實(shí)驗(yàn)快速工具集錦 |
| 復(fù)產(chǎn)復(fù)工在即，是時候回實(shí)驗(yàn)室開工做實(shí)驗(yàn)了。今天就向您介紹幾個好用的工具，讓您的酵母雜交實(shí)驗(yàn)更加簡單順暢！ |
| 文庫獲取 |
| 一、【擬南芥預(yù)制文庫】省去了繁瑣的建庫流程，文庫菌液可以直接用于mating方法進(jìn)行篩選： |
| 630487 Mate & Plate™ Library - Universal Arabidopsis (Normalized) |
| 擬南芥均一化預(yù)制文庫是高度復(fù)雜的cDNA文庫，文庫克隆到GAL4 AD載體上并轉(zhuǎn)化到酵母菌株Y187中。因?yàn)槲膸鞌U(kuò)增和酵母轉(zhuǎn)化操作已經(jīng)完成，所以使用這些文庫進(jìn)行雙雜交篩選更加省時省力。均一化處理降低了文庫中高豐度的轉(zhuǎn)錄本，使低豐度及稀少的cDNA得以富集，這樣的文庫更加具有基因代表性，也使篩選操作更加簡單，并大大降低了在篩選文庫時獲得假陽性的可能性。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 包含擬南芥不同生長時期和不同部分組織的cDNA酵母文庫 · 文庫經(jīng)過均一化處理，確保高、低豐度基因表達(dá)量均衡 · 通用型文庫，具有更高的基因代表性 · 篩選不再大海撈針 |
| * Takara公司的預(yù)制文庫還有Hela S3預(yù)制文庫、小鼠腦組織文庫、人腦組織文庫、果蠅預(yù)制文庫等，詳情請點(diǎn)擊：Mate & Plate預(yù)制文庫 均一化Mate & Plate文庫 |
| 二、【快速建庫試劑盒】如果沒有找到合適的預(yù)制文庫，可以自己制作，簡單快速： |
| 630490 Make Your Own "Mate & Plate" Library System |
| 構(gòu)建和篩選一個傳統(tǒng)的酵母雙雜交文庫是非常繁冗的。如果預(yù)制文庫中沒有適合您需要的文庫，您可使用Make Your Own Mate & Plate Library System自己制作文庫。利用該系統(tǒng)，一周之內(nèi)即可構(gòu)建足夠用于數(shù)百次酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)所需的文庫。文庫構(gòu)建是在Y187文庫酵母菌株中通過酵母高效的同源重組機(jī)制直接完成，無需傳統(tǒng)構(gòu)建過程中的文庫克隆、擴(kuò)增和大腸桿菌收集等繁瑣操作。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 利用SMARTer技術(shù)一步合成cDNA · 根據(jù)同源重組原理直接構(gòu)建酵母菌文庫 · 通無需繁瑣的克隆和文庫擴(kuò)增 · 為酵母雙雜交文庫篩選提供簡便方法 |
| SMARTer技術(shù)合成原cDNA原理 |
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| 誘餌載體構(gòu)建 |
| 一、【簡便&快速酵母轉(zhuǎn)化試劑】無需制備感受態(tài)細(xì)胞，釀酒酵母菌小規(guī)模轉(zhuǎn)化僅需1.5 hr |
| 631851 Quick & Easy Yeast Transformation Mix |
| Quick & Easy Yeast Transformation Mix用于釀酒酵母或畢赤酵母的小規(guī)模轉(zhuǎn)化，操作簡便、節(jié)省時間。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 釀酒酵母的轉(zhuǎn)化只需1.5 hr，畢赤酵母的轉(zhuǎn)化只需30 min · 無需制備酵母感受態(tài)細(xì)胞 · 可用平板培養(yǎng)1個月左右的釀酒酵母細(xì)胞起始轉(zhuǎn)化 |
| 與一般酵母轉(zhuǎn)化試劑的流程對比 |
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| 二、【預(yù)混型培養(yǎng)基】一次性鋁箔袋包裝的預(yù)混粉末，無需稱量，讓您配制培養(yǎng)基宛如沖調(diào)速溶咖啡一樣簡單 |
| 630306-630307 預(yù)混型YPDA培養(yǎng)基 |
| 酵母菌完全營養(yǎng)培養(yǎng)基，可以用于未轉(zhuǎn)化的酵母菌培養(yǎng)。培養(yǎng)基采用優(yōu)化后的配方，可以有效防止酵母菌落變紅。袋裝的預(yù)混培養(yǎng)基，方便使用。 |
| 630308-630325 預(yù)混型SD篩選培養(yǎng)基 |
| 在每個特定的預(yù)混型SD篩選培養(yǎng)基中，已經(jīng)去掉了相應(yīng)的氨基酸。例如，SD/-Leu/-Trp包含除亮氨酸和色氨酸之外的所有必需氨基酸。使用時僅需要將袋中的所有組分倒入三角瓶或培養(yǎng)瓶中，加入0.5 L的dH2O，然后滅菌即可。不需要單獨(dú)稱量、混合，也不需要調(diào)整pH值。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 無需稱量、混合、調(diào)整pH值 · 只需加入水，混合滅菌即可使用 |
| 陽性克隆驗(yàn)證 |
| 一、【酵母菌落PCR試劑盒】直接挑取陽性克隆進(jìn)行菌落PCR，初步判定插入片段的有無和大小： |
| 630497 Matchmaker Insert Check PCR Mix 2 |
| 可以簡便快速地直接以酵母菌落為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。這種完整的混合液專用于 Matchmaker Gold 酵母單雜交和雙雜交篩選系統(tǒng)，可以快速地擴(kuò)增、分選并分析文庫篩選所獲得的陽性克隆中prey/文庫質(zhì)粒的cDNA插入片段。試劑混合液中包含PCR聚合酶、引物、dNTPs和緩沖液，僅僅需要將細(xì)胞添加到混合液中，然后進(jìn)行30個循環(huán)PCR操作。引物也可以單獨(dú)購買。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 直接以酵母菌落為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，操作簡單快速 · 包含引物，dNTPs和緩沖液的預(yù)混試劑，只需要加入細(xì)胞即可 |
| 酵母菌落PCR實(shí)驗(yàn)流程 |
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| 二、【酵母質(zhì)粒提取試劑盒】利用酵母裂解酶破碎酵母細(xì)胞壁，讓您提取酵母質(zhì)粒就像提取細(xì)菌質(zhì)粒一樣簡單： |
| 630467 Easy Yeast Plasmid Isolation Kit |
| 利用酵母裂解酶破碎酵母細(xì)胞壁，并用SDS/堿裂解法獲得酵母原生質(zhì)體。采用Yeast Plasmid SPIN 純化柱純化質(zhì)粒DNA，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)繁，或作為模板用于PCR分析。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 用純化柱法提取酵母質(zhì)粒 · 包含高效的酵母裂解酶 · 用較少的時間純化DNA |
| 酵母質(zhì)粒提取實(shí)驗(yàn)流程 |
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| 互作蛋白質(zhì)驗(yàn)證 |
| 【快速免疫共沉淀試劑盒】：區(qū)別于傳統(tǒng)的瓊脂糖珠的方法，將protein A作為配基固定到優(yōu)化的Capturem膜上，僅需幾步離心操作就可以快速獲取抗體-蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)復(fù)合物 |
| 635721 Capturem™ IP & Co-IP Kit |
| Capturem™ IP & Co-IP Kit應(yīng)用于IP和Co-IP實(shí)驗(yàn)，為快速提取獨(dú)立蛋白質(zhì)或提取蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)復(fù)合物提供了完整、易用性的解決方案。它是一款基于新型膜技術(shù)的高性能“抗體-蛋白質(zhì)”復(fù)合物純化試劑盒，其中包含實(shí)驗(yàn)必備試劑，同時也提供結(jié)合、洗滌和洗脫buffer。實(shí)驗(yàn)從樣品上樣至洗脫完成僅需5 min。 |
| 制品特點(diǎn) |
| · 簡單和快速的實(shí)驗(yàn)流程：抗體與樣品孵育，之后在室溫下進(jìn)行的純化僅需5 min · 試劑盒中包含用于IP和Co-IP實(shí)驗(yàn)的Capturem Protein A純化柱和buffer，且均經(jīng)過優(yōu)化處理 · 洗脫液體積小，產(chǎn)物濃度高 · 樣品在膜上停留時間短，避免復(fù)合物的凝集、解體或失活 |
| Capturem™ IP & Co-IP Kit與普通Co-IP產(chǎn)品提取流程對比 |
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| 采用以上工具可以有效提高酵母雜交各步驟的實(shí)驗(yàn)速度，讓您體會“開掛”一樣的實(shí)驗(yàn)人生！ |
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頁面更新：2020-07-01 08:20:32
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