做探針法qPCR還可以更快?20min左右,了解一下?! | ||||||||||||||||||||||||
近年來,隨著流行病學(xué)調(diào)查和臨床診斷對快速檢測需求的不斷增長,快速qPCR得到了越來越廣泛的應(yīng)用,對快速qPCR的要求也越來越高,需要在保證qPCR反應(yīng)的特異性、靈敏度的同時,盡可能縮短反應(yīng)時間,即縮短每個步驟所需的時間和溫度轉(zhuǎn)換的時間,這就需要使用溫度轉(zhuǎn)換時間更短的快速儀器或設(shè)定快速反應(yīng)程序,同時搭配延伸活性、速率更高的專用定量試劑—— 繼Takara染料法快速qPCR新品CN830橫空出世并大獲成功后,Takara探針法快速qPCR新品又震撼來襲,可謂雙劍合璧,一騎絕塵?。ㄎ哪┯懈@吹阶詈笈叮。? |
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首先我們來了解一下新品信息: | ||||||||||||||||||||||||
♦ 產(chǎn)品規(guī)格: |
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♦ 產(chǎn)品特點: |
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· 擴(kuò)增速度快 |
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支持快速反應(yīng)程序,可在22 min/23 min內(nèi)(儀器快速模式)進(jìn)行可信度高的定量PCR分析,提高檢測效率。 | ||||||||||||||||||||||||
· 平臺通用 |
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適用于不同的qPCR儀器,在各儀器最短延伸時間下擴(kuò)增效果良好,能夠兼容不同儀器的快速反應(yīng)程序。 | ||||||||||||||||||||||||
· 高靈敏度 |
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性能出色的Hot Start PCR酶,搭配精心優(yōu)化的緩沖體系,提高擴(kuò)增靈敏度。 | ||||||||||||||||||||||||
· 雜質(zhì)耐受力強(qiáng) |
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對PCR阻害物抵抗性提高,樣本兼容性廣,對粗提品也能夠保持良好的擴(kuò)增性能,拓寬了前處理方法的簡便化等用途。 | ||||||||||||||||||||||||
· 操作便捷 |
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2X濃度的Premix試劑,只需要加入引物/探針、模板和水,便可通過探針法進(jìn)行定量PCR 反應(yīng)。 | ||||||||||||||||||||||||
· UNG防污檢測系統(tǒng) |
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添加UNG(Uracil N-Glycosylase)版本的試劑,可以有效防止因PCR產(chǎn)物污染造成的假陽性結(jié)果。 | ||||||||||||||||||||||||
· 精選反轉(zhuǎn)錄試劑 |
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一步法RT-qPCR試劑盒中采用了新型耐熱性反轉(zhuǎn)錄酶PrimeScript III RTase,可進(jìn)行高溫反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(高達(dá)55℃),更適合含復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板。 | ||||||||||||||||||||||||
♦ 實驗例 |
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實驗例1:快速擴(kuò)增能力 |
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(1)對長度為186 bp的hACTB基因,分別在快速(延伸時間10 sec)和普通(延伸時間30 sec)qPCR反應(yīng)條件下,使用4款新品進(jìn)行擴(kuò)增能力檢測。結(jié)果顯示,無論是快速程序還是普通程序,4款新品均能實現(xiàn)良好擴(kuò)增,性能無明顯差異,均適用于快速qPCR反應(yīng)。 | ||||||||||||||||||||||||
(2)在快速qPCR反應(yīng)條件(延伸時間10 sec)下,使用新品分別對GAPDH/Transcript 4.4K/ApoE基因進(jìn)行擴(kuò)增,其中Transcript 4.4K是特殊設(shè)計的低擴(kuò)增效率序列,常用來評估產(chǎn)品性能;ApoE為GC含量64.52%的高GC基因。 結(jié)果顯示,4款新品針對不同難度的模板擴(kuò)增性能良好,且均適用快速qPCR反應(yīng)程序。 |
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實驗例2:強(qiáng)大的雜質(zhì)耐受力 |
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(1)不同抗凝劑處理的血液粗提液:取10 μl不同抗凝劑處理的豬血樣品制備粗提液,使用新品分別對粗提液進(jìn)行快速qPCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示,4款新品對3種抗凝劑處理的豬血粗提液均能實現(xiàn)快速擴(kuò)增,性能良好。 | ||||||||||||||||||||||||
(2)動物&植物組織粗提液:分別選取豬肉、牛肉、玉米葉片和小麥苗制備粗提液,使用新品分別對粗提液進(jìn)行快速qPCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示,4款新品對動物&植物粗提液都具有良好的擴(kuò)增能力。 | ||||||||||||||||||||||||
(3)唾液稀釋液&裂解液:使用RT-qPCR新品對唾液稀釋液(H2O稀釋)和唾液裂解液進(jìn)行快速qPCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示,2款新品對唾液樣本具有很好的擴(kuò)增效果,抗阻害能力強(qiáng)。 | ||||||||||||||||||||||||
實驗例3:多重快速qPCR的檢測能力 |
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重點來了?。?! | ||||||||||||||||||||||||
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一、新品免費試用 |
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二、新品限時大促 |
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三、新品試用反饋 |
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頁面更新:2023-12-21 09:52:06