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一步法RT-qPCR染料法檢測(cè)試劑盒One Step TB Green^® PrimeScript^™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	RR086A	One Step TB Green^® PrimeScript^™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)	100 Rxns	￥2,399
Takara	RR086B (A × 5)	One Step TB Green^® PrimeScript^™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)	100 Rxns × 5	￥11,737

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■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR086A: 50 μl反應(yīng)×100次)

2X One Step TB Green RT-PCR Buffer 4^*1	840 μl × 3 支
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 2^*2	200 μl
RNase Free dH2O	1.25 m l × 2 支
ROX Reference Dye (50X)^*3	100 μl
ROX Reference Dye II (50X)^*3	100 μl

1 內(nèi)含dNTP Mixture，Mg²⁺，TB Green等。 2 內(nèi)含PrimeScript RTase，RNase Inhibitor和TaKaRa Ex Taq HS。 *3 用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差。 ◆ 使用ROX Reference Dye · Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) · StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 使用ROX Reference Dye II · Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 不必使用的擴(kuò)增儀 · Thermal Cycler Dice Real Time System series (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990， TP900/TP960/TP700/TP760：終賣) · LightCycler (Roche Diagnostics)

■ 制品說明

本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行One Step RT-PCR反應(yīng)的專用試劑。使用本制品進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)可在同一反應(yīng)管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行，操作簡(jiǎn)單，并能有效防止污染。本反應(yīng)體系由于可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)，大大提高了檢測(cè)靈敏度，并省略了PCR反應(yīng)后的電泳步驟，非常適合于RNA病毒等微量RNA的檢測(cè)。
制品中使用了適合于Real Time RT-PCR的反轉(zhuǎn)錄酶PrimeScript RTase和高效的PCR熱啟動(dòng)酶TaKaRa Ex Taq^® HS，具有高擴(kuò)增效率和高擴(kuò)增特異性，能進(jìn)行穩(wěn)定的Real Time One Step RT-PCR反應(yīng)。本制品的Buffer經(jīng)過改良，使反應(yīng)的特異性比使用One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit（Perfect Real Time）（Code No. RR066A）更高。另外，反應(yīng)使用的所有酶都配制成了Enzyme Mix的形式，使操作更加方便簡(jiǎn)單。

■ 保存

-20℃。

2X One Step TB Green RT-PCR Buffer 4 請(qǐng)于-20℃避光保存。

■ 試劑盒特長(zhǎng)

1. 進(jìn)行Real Time One Step RT-PCR反應(yīng)，可以快速、準(zhǔn)確地對(duì)RNA病毒等微量RNA 進(jìn)行分析。
2. PCR反應(yīng)使用了高效的TaKaRa Ex Taq HS，可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應(yīng)，再與Takara公司特別開發(fā)的Buffer系統(tǒng)相結(jié)合，具有高擴(kuò)增效率，高擴(kuò)增靈敏度之特點(diǎn)。2X One Step TB Green RT-PCR Buffer 4中預(yù)先混有TB Green等，反應(yīng)用酶也配制成了Mix的形式，使反應(yīng)液配制更加簡(jiǎn)單方便。

■ 注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)同時(shí)需要進(jìn)行數(shù)次Real Time One Step RT-PCR反應(yīng)時(shí)，應(yīng)先配制各種試劑的混合液，然后再分裝到每個(gè)反應(yīng)管中。這樣，可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確，減少試劑損失，避免重復(fù)分取同一試劑。同時(shí)也可以減少實(shí)驗(yàn)操作或?qū)嶒?yàn)樣品之間產(chǎn)生的誤差。
2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 2時(shí)，應(yīng)輕輕混勻，避免起泡；分取之前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時(shí)應(yīng)慢慢吸取。-20℃保存，使用后立即放回冰箱。
3. 2X One Step TB Green RT-PCR Buffer 4 融解后如有不溶物請(qǐng)充分混合，使用Vortex 等振蕩完全溶解后使用。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請(qǐng)一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等，盡量避免污染。
5. 制品只能使用基因特異性反轉(zhuǎn)錄引物，不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

Technote：
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頁(yè)面更新：2023-12-01 16:09:04

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