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培養(yǎng)細(xì)胞RT-PCR定量檢測(cè)試劑盒CellAmp^™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱(chēng)	包裝量	價(jià)格（元）	說(shuō)明書(shū)	數(shù)量
Takara	3734	CellAmp^™ Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2	100 Rxns	￥1,685

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無(wú)標(biāo)題文檔

■ 制品內(nèi)容 (5 μl反應(yīng)體系，100次量)

Lysis Buffer (4X)	150 μl
Recombinant RNase Inhibitor (40 U/μl)	30 μl
RT dT Primer 2	12 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each)	12 μl
MgCl2 (22.5 mM)	36 μl
RT Enzyme Mix 2^*1	36 μl
Exonuclease I (5 U/μl)	72 μl
TdT Buffer (5X)	144 μl
dATP (90 mM)	24 μl
TdT Enzyme Mix^*2	54 μl
PCR Primer Mix 2	300 μl
RNase Free dH2O	1 ml

1 含有PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor。 2 含有Terminal Deoxynucleotidyl Transferase、RNase H。

Limited Use Label License：[L54]

■ 制品說(shuō)明

本制品是從少數(shù)細(xì)胞直接反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，然后對(duì)反轉(zhuǎn)錄的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增的試劑盒。擴(kuò)增的cDNA可以作為Real Time PCR的模板使用。通常情況下，進(jìn)行微量核酸提取時(shí)，純化過(guò)程中核酸會(huì)有所損失，使用本制品不需要對(duì)細(xì)胞RNA和反轉(zhuǎn)錄的cDNA進(jìn)行純化，即可對(duì)反轉(zhuǎn)錄的cDNA高效擴(kuò)增。
使用本試劑盒首先溶解細(xì)胞，然后使用dT Adaptor Primer（RT dT Primer 2）進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，由mRNA合成cDNA，通過(guò)TdT酶對(duì)合成的cDNA進(jìn)行dA加尾反應(yīng)后，以此作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)擴(kuò)增cDNA。
本制品除了能從少數(shù)細(xì)胞直接進(jìn)行cDNA擴(kuò)增外，也可以對(duì)微量的RNA進(jìn)行cDNA擴(kuò)增。
本試劑盒還添加了Exonuclease I 的處理步驟，能夠抑制引物的非特異性擴(kuò)增，并且提高低表達(dá)水平基因的擴(kuò)增產(chǎn)量。

■ 保存

-20℃。

■ 注意事項(xiàng)

1. 為了保證反應(yīng)液配制的準(zhǔn)確性，進(jìn)行各項(xiàng)反應(yīng)時(shí)，應(yīng)先按反應(yīng)數(shù)+1的量配制Master Mix，然后再分裝到每個(gè)反應(yīng)管中。因?yàn)榉磻?yīng)體系比較小，建議每次反應(yīng)至少要配置5個(gè)反應(yīng)以上的Master Mix。
2. 各步反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)管放在冰上冷卻，輕微離心后再進(jìn)入下一步操作。
3. 請(qǐng)使用0.2 ml的Microtube和PCR儀進(jìn)行反應(yīng)。

頁(yè)面更新：2024-01-31 15:03:55

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