□ 起源:Acetobacter pasteurianus sub. pasteurianus |
□ 反應溫度:37℃ |
□ 活性測定用底物:λ DNA |
□ 活性測定:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反應體系中,在37℃條件下,經過5 min反應,將1 μg λ DNA完全消化所需要的酶量。 |
□ 甲基化的影響:根據識別序列后續(xù)堿基的不同,有時受dcm methylase、CG methylase的影響。 |
□ 使用注意:
1) 不建議進行16 hr以上酶切,易導致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶進行雙酶切或多酶切反應時,加入限制酶的總體積不能超過反應體系的1/10量;如果各酶的反應溫度不同,建議按低溫到高溫的順序加入相應的QuickCut限制酶進行分步酶切反應。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能會干擾酶切產物的熒光分析。因此,酶切產物熒光分析檢測時推薦使用無色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出現沉淀,室溫下振蕩5分鐘可使沉淀完全溶解,不影響使用。 |
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