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產(chǎn)品選擇指南

技術服務信息

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無細胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)Human Cell-Free Protein Expression System
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 3281 Human Cell-Free Protein Expression System 10 Rxns ￥2,438
Takara 3290 pT7-IRES His-N DNA 20 μg ￥1,547
Takara 3291 pT7-IRES His-C DNA 20 μg ￥1,547
Takara 3292 pT7-IRES Myc-N DNA 20 μg ￥1,547
無標題文檔
 
■ 制品內(nèi)容(Code No. 3281)
Cell Lysate＊1 100 μl
Mixture-1  60 μl
Mixture-2＊2 10 μl
Mixture-3＊2 20 μl
T7 RNA Polymerase (200 U/μl)  10 μl
pT7-IRES Vector (0.5 μg/μl) 20 μl
Control Vector＊3 (0.3 μg/μl) 5 μl
 
*1 現(xiàn)用現(xiàn)融解，使用微量移液器輕輕混合均勻并迅速使用，使用完畢立即置于-80℃保存。
注：雖然5次反復凍融基本不會造成產(chǎn)品性能下降，但建議小量分裝保存。
*2 Mixture-2和Mixture-3中均含有蛋白質(zhì)，其中Mixture-2中含有HN標簽蛋白質(zhì)，因此應避免劇烈攪拌或振蕩。
*3 該質(zhì)粒在pT7-IRES中插入了β-半乳糖苷酶基因。
 
■ 制品說明
Human Cell-Free Protein Expression System是利用人源細胞提取物的無細胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)。本系統(tǒng)中的Cell Lysate包含了所有體外蛋白質(zhì)合成的必需因子(核糖體、翻譯起始/延伸因子和tRNA等)。只需將攜帶靶基因的pT7-IRES Vector、T7 RNA Polymerase、Mixture-3(氨基酸和ATP等)和Mixture-2(翻譯增強因子)加入到Cell Lysate中，就可以在一個反應管中完成從RNA轉(zhuǎn)錄到蛋白質(zhì)合成的反應，操作十分簡單。本制品具有反應體系小、反應速度快、可合成無細胞蛋白質(zhì)的優(yōu)點。 pT7-IRES Vector轉(zhuǎn)錄得到的目的RNA含有IRES序列，這段序列能夠增強蛋白質(zhì)翻譯的起始。反應液中添加了翻譯增強因子，在蛋白質(zhì)合成過程中，它能夠活化Cell Lysate中無活性的翻譯起始因子，從而維持了穩(wěn)定的翻譯水平。本系統(tǒng)不僅提高了蛋白質(zhì)合成的效率，彌補了哺乳類無細胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)翻譯水平低的缺陷，而且能夠合成超過150 kDa的高分子量蛋白質(zhì)。 本系統(tǒng)適用于高通量的蛋白質(zhì)合成反應，只需一步即可完成。由于毒性蛋白會抑制宿主細胞生長和功能，導致很難利用活細胞表達系統(tǒng)來合成毒性蛋白質(zhì)，所以本系統(tǒng)尤其適用于合成毒性蛋白質(zhì)。
 
* 3290/3291/3292與3281搭配使用，可表達帶有His標簽或Myc標簽的蛋白質(zhì)。
 
■ 保存
3281：-80℃；3290、3291、3292：-20℃。
 
■ pT7-IRES Vector 的結構
 
 

頁面更新：2024-02-29 09:40:58

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