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產(chǎn)品選擇指南

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可制備高滴度AAV的無(wú)輔助病毒系統(tǒng)AAVpro® Helper Free System
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說(shuō)明書(shū) 數(shù)量
Takara 6673 AAVpro® Helper Free System (AAV1) 20 μg each ￥8,011
Takara 6230 AAVpro® Helper Free System (AAV2) 20 μg each ￥8,011
Takara 6650 AAVpro® Helper Free System (AAV5) 20 μg each ￥8,011
Takara 6651 AAVpro® Helper Free System (AAV6) 20 μg each ￥8,011
Takara 6672 AAVpro® Packaging Plasmid (AAV1) 1 mg each ￥8,251
Takara 6234 AAVpro® Packaging Plasmid (AAV2) 1 mg each ￥8,251
Takara 6664 AAVpro® Packaging Plasmid (AAV5) 1 mg each ￥8,251
Takara 6665 AAVpro® Packaging Plasmid (AAV6) 1 mg each ￥8,251
無(wú)標(biāo)題文檔
 
 
AAV表達(dá)載體 → AAV包裝系統(tǒng) → 293T包裝細(xì)胞 → AAV提取 → AAV濃縮 → AAV純化 → AAV滴度測(cè)定
 
 
■ 制品說(shuō)明
腺相關(guān)病毒 (AAV) 是Dependovirus屬Parvovirus家族的無(wú)包膜病毒。AAV對(duì)人無(wú)致病性，只有在輔助病毒如腺病毒或皰疹病毒存在下才能復(fù)制。AAV基因組是約4.7 kb的單鏈線狀DNA分子，在每個(gè)末端都有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的反向末端重復(fù)序列 (ITRs) ，ITRs的功能在于基因組復(fù)制起始位點(diǎn)及包裝病毒粒子。AAV基因組包含了3個(gè)開(kāi)放閱讀框 (圖1) ：Rep編碼參與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)；Cap編碼病毒衣殼蛋白質(zhì)；AAP編碼用于病毒粒子形成的非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。Rep區(qū)域編碼4種不同的蛋白質(zhì) (Rep78, Rep68, Rep52和Rep40) ，Cap區(qū)域編碼3種不同的蛋白質(zhì) (VP1, VP2和VP3) 。
AAV有100多種血清型，不同血清型病毒間的宿主特異性和特點(diǎn)有所不同。Takara Bio Inc.提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 的制備試劑盒。2型 (AAV2) 具有廣泛的研究應(yīng)用，包括基因治療，也具備泛嗜性特點(diǎn)。而AAV1、AAV5和AAV6卻受限于組織宿主。AAV1對(duì)于肌肉、肝臟、呼吸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；AAV5對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟和視網(wǎng)膜有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；AAV6對(duì)于心肌細(xì)胞、肌肉和肝臟有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。
腺相關(guān)病毒載體 (AAV載體) 能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入細(xì)胞和生物體，可用作研究工具和基因治療的載體。另外，AAV載體較腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體更安全。AAV載體能用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入增殖和非增殖細(xì)胞，以及在未分裂細(xì)胞內(nèi)的長(zhǎng)期表達(dá)，AAV很少有免疫原性，非常適用于轉(zhuǎn)導(dǎo)基因進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi) (作為體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)工具) 。
 
■ 制品特點(diǎn)
使用AAV Helper Free System制備AAV病毒
AAV Helper Free System是一種特別的可制備高滴度AAV的無(wú)輔助病毒系統(tǒng) (圖2) 。6230試劑盒包含3種質(zhì)粒，只需將制備AAV病毒所需的這3種載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染于HEK293細(xì)胞中，即可制備AAV病毒。
·pRC2-mi342 Vector：包含AAV2的Rep基因和Cap基因
 *pRC2-mi342可表達(dá)hsa-miR-342，hsa-miR-342是一種病毒制備系統(tǒng)中可提高病毒滴度的人源miRNA。與一般 只表達(dá)Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比，病毒滴度可提高2倍。
·pHelper Vector：包含腺病毒的E2A、E4和VA基因的載體質(zhì)粒。
·pAAV-CMV Vector：包含目的基因表達(dá)啟動(dòng)子和2個(gè)ITR的載體質(zhì)粒。質(zhì)粒包含目的基因克隆（GOI）位點(diǎn)，GOI 由CMV啟動(dòng)子表達(dá)。由于AAV病毒中能夠包裝的插入DNA大小有限，使用試劑盒中pAAV-CMV Vector時(shí)，插入的DNA片段大小應(yīng)在2.5 kb以下。
 
圖2.使用AAVpro Helper Free System 制備AAV病毒
 
■ 制品內(nèi)容
AAVpro® Helper Free System (AAV1) （Code No. 6673）
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC1 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV2)（Code No. 6230）
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M83], [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV5) （Code No. 6650）
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC5 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M84]
 
AAVpro® Helper Free System (AAV6) （Code No. 6651）
pAAV-CMV Vector (1 μg/μl) 20 μl
pRC6 Vector (1 μg/μl) 20 μl
pHelper Vector (1 μg/μl) 20 μl
AAV Extraction Solution A 1.5 ml×3
AAV Extraction Solution B 150 μl×3
   
Limited Use Label License: [M84]
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV1) （Code No. 6672）
pRC1 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV2) （Code No. 6234）
pRC2-mi342 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
Limited Use Label License: [M83]
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV5) （Code No. 6664）
pRC5 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
 
AAVpro® Packaging Plasmid (AAV6) （Code No. 6665）
pRC6 Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
pHelper Vector (1 μg/μl) 0.5 ml×2
   
■ 各載體序列
zip壓縮形式，點(diǎn)擊查看：
· pAAV-CMV（fasta data）
· pAAV-LacZ（fasta data）
· pHelper（fasta data）
· pRC1（fasta data）
· pRC5（fasta data）
· pRC6（fasta data）
· pRC2-mi342（fasta data）
 
■ 保存
-20℃。
AAV Extraction Solution A 和AAV Extraction Solution B融解后，請(qǐng)于室溫保存。
 
 
 

頁(yè)面更新：2024-01-25 16:00:03

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