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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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Capturem膜技術(shù) Capturem^™ Trypsin （質(zhì)譜級(jí)）
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Clontech	635740	Capturem^™ Trypsin Miniprep Kit (Mass Spectrometry Grade)(庫存銷售完畢即終賣)	20 Rxns	￥3,430

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■ 產(chǎn)品簡介

Capturem^™ Trypsin能在室溫下快速、高效并且完整的酶解消化蛋白質(zhì)用于質(zhì)譜分析，與需要4小時(shí)甚至過夜的傳統(tǒng)蛋白質(zhì)酶解消化操作流程相比，可以使蛋白質(zhì)組學(xué)分析流程更加連貫、流暢。本制品基于新型Capturem^™ 膜技術(shù)，膜上固定trypsin（豬胰腺來源，且經(jīng)過還原甲基化修飾，穩(wěn)定性和抗自溶能力都顯著增強(qiáng)），有小型離心柱以及96孔板的形式可供選擇，能在短短幾分鐘內(nèi)完成獨(dú)立或高通量樣品的蛋白質(zhì)酶解消化，不需要溶液法的長時(shí)間孵育（長時(shí)間孵育易造成蛋白質(zhì)的氧化或非特異性修飾，最終導(dǎo)致鑒定困難并且重復(fù)性低），并且自溶片段很少，效率更高。此外，使用小離心柱或plate的方法操作速度快，更能避免溶液法易出現(xiàn)的過度酶解消化的情況。每個(gè)小離心柱或96 well plate的單孔最大上樣量為80 μg的蛋白質(zhì)或25 μg的抗體。

■ 產(chǎn)品特點(diǎn)

·操作快速，步驟簡單，Miniprep產(chǎn)品4 min內(nèi)即可在室溫下酶解蛋白質(zhì)樣品，無需過夜處理
·比溶液法效率更高，酶解更徹底，且不易出現(xiàn)過度酶解
·Trypsin經(jīng)過修飾穩(wěn)定性更高，樣品中自溶片段更少，蛋白質(zhì)非特異性修飾幾率更低
·可以使整個(gè)蛋白質(zhì)組學(xué)分析流程更加連貫，實(shí)現(xiàn)更有效的肽和蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定
·有獨(dú)立的小型離心柱和高通量的96 well plate形式可供選擇，滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求

* 4 × 96-Well Plates包裝的產(chǎn)品不包含Activation Buffer，需要搭配購買635739或自行配制，每個(gè)plate需要搭配使用25 ml Activation Buffer

■ 操作流程

Capturem^™ Trypsin消化流程。 在用活化buffer激活Capturem^™ Trypsin后，將天然狀態(tài)或經(jīng)變性處理的樣品溶液（50-800 μl）加入孔中，通過2 min的離心使樣品過柱。在柱上進(jìn)行胰蛋白酶消化，隨后肽片段再次進(jìn)行2 min的離心洗脫。與傳統(tǒng)溶液法需要過夜消化的時(shí)長相比，Capturem^™ Trypsin進(jìn)行完全的抗體消化僅需3-6 min。*本流程不包括變性/還原/烷基化的時(shí)間。

■ 產(chǎn)品應(yīng)用

·蛋白質(zhì)鑒定
·蛋白質(zhì)組學(xué)分析
·質(zhì)譜樣品制備
·抗體鑒定

■ 實(shí)驗(yàn)例