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| ■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 |
Capturem™ Protein G 系列產(chǎn)品是基于Protein G* 原理，結(jié)合新型膜技術(shù)的一次性抗體純化柱，特別適用于單克隆抗體和多克隆抗體的小量快速純化和篩選。室溫下操作即可，小量純化僅需5 min，因此無(wú)須擔(dān)心抗體的降解或失活。Capturem™ 系列產(chǎn)品以高性能的尼龍膜為介質(zhì)并對(duì)其進(jìn)行改造，增加了膜孔表面積，對(duì)抗體的結(jié)合能力≥75 mg/cm3。產(chǎn)品最突出的特點(diǎn)是柱床體積小，可在室溫下操作，純化簡(jiǎn)單快速，可實(shí)現(xiàn)抗體的高濃度、高純度純化。產(chǎn)品有小量（miniprep）以及高通量（24 well、96 well）四種規(guī)格可供選擇。
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*Protein G是來(lái)源于Staphylococcus aureus的細(xì)胞壁蛋白質(zhì)，與許多物種（人、大小鼠等）的單克隆或多克隆IgG型抗體分子的Fc段有高親和性。本制品使用的是重組protein G，去掉了白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)合結(jié)構(gòu)域，從而提高了與抗體Fc片段的結(jié)合特異性。
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| ■ 產(chǎn)品特點(diǎn) |
· 快速方便：從上樣到洗脫，室溫下操作小量純化僅需5 min，無(wú)需上樣后孵育
· 結(jié)合力強(qiáng)：膜與抗體的結(jié)合能力≥75 mg/cm3
· 高質(zhì)量：樣品停留時(shí)間短，從而有效地防止了抗體降解及失活，保障了下游應(yīng)用的成功率
· 高純度、高濃度：柱床體積小，帶入污染少，可實(shí)現(xiàn)大體積洗滌，小體積洗脫
· 高靈活性：可從廣泛來(lái)源的樣品中純化多種類型的抗體，如動(dòng)物血清、腹水、細(xì)胞培養(yǎng)基等
· 一次性使用：有效減少樣品間的交叉污染，單孔的純化產(chǎn)量因樣品類型、物種以及抗體同種型的不同而有所差別。
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注：Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（Code No. 635745）經(jīng)過優(yōu)化，與舊版本產(chǎn)品（Code No. 635732）相比，收量更高
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| ■ Capturem™ 膜原理 |
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| ■ 操作流程 |
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| ■ 產(chǎn)品主要參數(shù) |
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Capturem™ Protein G Miniprep |
Capturem™Protein G 24-Well Plate-HC |
Capturem™Protein G 96-Well Plate |
| 包裝量 |
10次 |
24 well |
96 well |
| 樣品上樣量*1 |
100～800 μl |
0.5～4.3 ml/well |
200～1,000 μl/well |
| 操作時(shí)長(zhǎng) |
5 min |
15 min |
15 min |
| 收量*2 |
60 μg
protein/column |
600 μg*3
protein/well |
60 μg
protein/well |
| 洗脫液使用量 |
100-300 μl |
1.8 ml |
100-300 μl |
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*1. 樣品與binding buffer的稀釋比例為1:2～1:15。建議雜交瘤樣品1:2～1:4稀釋，血清樣品1:15稀釋。
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*2. 收量多少取決于樣品的類型、物種以及抗體同種型（isotype）。
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*3. 這是在HEK293細(xì)胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1時(shí)獲得的收量。
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| ■ Protein A和Protein G對(duì)于不同來(lái)源和亞型抗體的親和性 |
| Species |
Antibody subtype |
Protein A |
Protein G |
Protein A/G |
| Human |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG1 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG2 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG3 |
+ |
+++ |
+++ |
| lgG4 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgM |
+ |
- |
+ |
| lgD |
- |
- |
- |
| lgA1 |
+ |
- |
+ |
| lgA2 |
+ |
- |
+ |
| Fab |
+ |
+ |
+ |
| scFv |
+ |
- |
+ |
| Mouse |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgM |
- |
- |
- |
| lgG1 |
+ |
++ |
++ |
| lgG2a |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG2b |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG3 |
+++ |
+++ |
+++ |
| Rat |
Total lgG |
+ |
++ |
++ |
| lgG1 |
+ |
++ |
++ |
| lgG2a |
- |
+++ |
+++ |
| lgG2b |
- |
+ |
+ |
| lgG2c |
+++ |
+++ |
+++ |
| Rabbit |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
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+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
- no binding
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| ■ 各試劑盒組成 |
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| Capturem™ Protein G Miniprep（635725） |
Miniprep Column 10個(gè)
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| Capturem™ Protein G 96-Well Plate（635726） |
96 well plate 1塊
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| Capturem™ Protein G 24-Well Plate（635732） |
24 well plate 1塊
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| Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635745） |
24 well plate 1塊
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【注】由于Capturem Protein G系列產(chǎn)品不包含buffer和收集管，請(qǐng)按以下建議配制buffer和準(zhǔn)備材料。
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1. 純化buffer
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本制品可搭配使用磷酸鹽、檸檬酸鹽緩沖液等抗體純化常用試劑。標(biāo)準(zhǔn)的buffer配方請(qǐng)參考說明書中內(nèi)容，需要注意的是，buffer的鹽濃度和pH值對(duì)純化抗體的收量和純度的影響會(huì)因抗體的同種型不同而不同。
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2. 收集tube/plate
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使用Miniprep產(chǎn)品進(jìn)行1次純化，需要額外準(zhǔn)備4個(gè)2 ml tube
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使用96 well產(chǎn)品進(jìn)行1次純化，需要額外準(zhǔn)備4個(gè)96 well collection plate
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使用24 well產(chǎn)品進(jìn)行1次純化，需要額外準(zhǔn)備4個(gè)24 well collection plate
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京公網(wǎng)安備 110114000405號(hào)
