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前病毒拷貝數(shù)測(cè)定Provirus Copy Number Detection Primer Set,Human (for Real Time PCR)
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	6167	Provirus Copy Number Detection Primer Set,Human (for Real Time PCR)	100 Rxns	￥959

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■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×100 次量)

Retrovirus Primer Mix for Provirus, Human (10 pmol/μl each)	50 μl
Retrovirus Probe for Provirus, Human (10 pmol/μl)^*	50 μl
hIFNγ Primer Mix for Provirus (10 pmol/μl each)	50 μl
hIFNγ Probe for Provirus (10 pmol/μl)^*	50 μl
DNA Control Template for Provirus, Human (200 pg/μl)	15 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR)	1 ml × 4

* 熒光標(biāo)記探針應(yīng)避光保存。

■ 制品說明

本制品是利用Real Time PCR方法對(duì)以MLV(murine leulcemia Virus: 鼠白血病病毒) 為基礎(chǔ)的逆轉(zhuǎn)錄病毒 (Retrovirus) 載體向人體正常細(xì)胞中導(dǎo)入基因時(shí)，測(cè)定前病毒拷貝數(shù)的試劑盒。前病毒 (Provirus) 是指逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組整合至宿主DNA中的狀態(tài)，此狀態(tài)稱為前病毒。
本制品與CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 組合使用，通過測(cè)定導(dǎo)入基因的人體正常細(xì)胞基因組DNA來(lái)測(cè)定前病毒拷貝數(shù)。另外，本制品擴(kuò)增的區(qū)域?yàn)镸LV的包裝信號(hào)區(qū)，因此，可以測(cè)定大部分以MLV為基礎(chǔ)的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入人體正常細(xì)胞后的前病毒拷貝數(shù)。
傳統(tǒng)的前病毒測(cè)定方法是把導(dǎo)入基因的宿主細(xì)胞克隆后，通過Southern blotting方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算出前病毒的平均拷貝數(shù)。計(jì)算平均拷貝數(shù)需要大量克隆進(jìn)行Southern blotting，此方法耗時(shí)、費(fèi)力。使用本制品不需要進(jìn)行細(xì)胞的克隆即可簡(jiǎn)單地計(jì)算出前病毒的拷貝數(shù)。
與本制品組合使用的CycleavePCR Core Kit是采用Cycling探針法進(jìn)行Real Time PCR反應(yīng)的專用試劑盒，具有檢出特異性高的優(yōu)勢(shì)，能夠抑制背景基因組DNA的影響，從而簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確地對(duì)目的基因進(jìn)行定量分析。

■ 保存

-20℃。

■ 注意事項(xiàng)

1. 應(yīng)先配制各種試劑的混合液，將dH2O、buffer 、酶等配制成Master Mix，可以減少試劑的損失及分裝、混合的次數(shù)，使反應(yīng)試劑體積更準(zhǔn)確，防止實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間產(chǎn)生誤差。
2. 使用前將CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 中含有的TaKaRa Ex Taq HS和Tli RNase H II輕離心至Tube底部后再使用；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時(shí)應(yīng)慢慢吸??；酶類制品應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前從-20℃中取出，使用后立即放入-20℃保存。
3. CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 中含有的10×CycleavePCR Buffer在保存過程中有時(shí)會(huì)產(chǎn)生沉淀物，溶解后不影響使用。Vortex使其完全溶解后再使用。
4. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。

頁(yè)面更新：2024-02-29 10:22:00

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