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產(chǎn)品選擇指南

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長鏈PCR酶TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	RR370A	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase	200 Rxns	￥950
Takara	RR370B(A×4)	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase	800 Rxns	￥3,686
Takara	RR370S	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase	40 Rxns	￥283
Takara	RR371A	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase Dye plus	200 Rxns	￥950
Takara	RR371B(A×4)	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase Dye plus	800 Rxns	￥3,686
Takara	RR371S	TaKaRa Ex Premier^™ DNA Polymerase Dye plus	40 Rxns	￥283

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■ 制品內(nèi)容 (Code No. RR370A/RR371A，50 μl反應(yīng)體系×200次)

RR370S	TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×)	1 ml
RR370A	TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×)	1 ml×5
RR371S	TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×)	1 ml
RR371A	TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×)	1 ml×5

■ 制品說明

TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase是基于Thermococcus屬古細菌來源的DNA polymerase新研發(fā)的α型PCR酶。
本制品通過優(yōu)化酶和buffer，提高了對一般PCR試劑難以擴增的GC/AT rich、長鏈、粗提樣品的擴增成功率。并且具有卓越的校對能力，保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性，獲得的PCR擴增結(jié)果特異性高，可用于克隆。
本制品是PCR反應(yīng)用的DNA Polymerase、Buffer、dNTP Mixture的2倍濃度的混合物。由于在-20℃下保存不會凍結(jié)，所以不需要融化，可以直接加入引物和模板進行PCR擴增。
此外，TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus（Code No. RR371）版本中，已含有電泳時所必需的色素試劑 (綠色：藍色和黃色色素)，PCR反應(yīng)后可以直接進行電泳。
本制品是添加了在常溫下能夠抑制DNA Polymerase活性和3’→5’exonuclease活性的抗體的Hot Start型DNA聚合酶。
另外，因為本制品具有校正活性，擴增的PCR產(chǎn)物大部分都是平滑末端。因此，不能直接進行TA克隆。如果需要進行克隆，推薦In-Fusion克隆或克隆到平滑末端載體。如果想克隆到T載體上，則需要對3’末端進行dA加尾反應(yīng)，推薦使用Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR^®（Code No. 6019）。
【補充】
本制品與In-Fusion克隆系統(tǒng)產(chǎn)品組合使用，可以在短時間內(nèi)高效地將PCR片段克隆到任意載體上。
In-Fusion克隆可以使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix（Code No. 638947）等系列產(chǎn)品（參見相關(guān)產(chǎn)品頁，了解詳情）。

■ 保存

-20℃。
※注意事項：
使用前請避免劇烈攪拌，輕輕顛倒混勻并離心集液至管底。

■ 特點

· GC/AT rich、長鏈、粗提樣品等難以擴增的模板也能高成功率擴增
· 具有卓越的校對能力，保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性
· 2X Premix型試劑，-20℃保存不會凍結(jié)，減少操作時間
· 添加色素試劑的版本（綠色），可視性好，可直接進行電泳，操作更簡便。

■ 用途

PCR法的DNA擴增
特別推薦用于以下PCR擴增：
· GC-rich、AT-rich等普通酶難以擴增的模板擴增
· 10 kb以上片段的長鏈PCR
· 動物組織（如小鼠尾）、植物組織、血液樣本等粗提樣品起始的擴增
· 核酸含量高的cDNA起始的擴增
· 以克隆為目的的目的基因和載體的擴增

■ 以cDNA為模板時，PCR的注意事項

根據(jù)cDNA合成反應(yīng)液成分的不同，作為模板的cDNA加入到PCR反應(yīng)液中，可能會出現(xiàn)沉淀。
cDNA合成推薦使用PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit（Code No. 6210A/B）、PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix（Code No. 6215A/B）

■ PCR條件

TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase（2×)	25 μl（final conc. 1×）
Primer 1	10～15 pmol（final conc. 0.2～0.3 μM）
Primer 2	10～15 pmol（final conc. 0.2～0.3 μM）
Template	10 pg ～ 750 ng（參照說明書中「推薦模板添加量」）

滅菌水	Up to 50 μl