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16S rRNA建庫試劑盒16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	R161A	16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS	50 Rxns	￥6,703
Takara	R161B (A × 2)	16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS	50 Rxns × 2	￥12,893

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■ 制品內(nèi)容 (Code No.: R161A)(50次量)

2×Gflex PCR Buffer (Mg²⁺, dNTP plus)	1.25 ml
Tks Gflex DNA Polymerase（1.25 units/μl)	62.5 U（50μl）
16S V3-V4 Primer Mix（10×）	125 μl
H2O	1 ml

■ 制品說明

本制品是使用Illumina公司MiSeq對細(xì)菌叢16S rRNA進(jìn)行解析時使用的PCR擴(kuò)增試劑盒。以細(xì)菌16S rRNA基因的V3-V4區(qū)域?yàn)閷ο?，使用對多樣序列能有效擴(kuò)增的PCR酶Tks Gflex^™ DNA Polymerase進(jìn)行擴(kuò)增。
引物是采用設(shè)計在常用的高效擴(kuò)增區(qū)域（V3-V4）上的341F、806R（見圖1），在引物的5’端連有Illumina MiSeq用的overhang序列。使用本試劑盒擴(kuò)增得到PCR產(chǎn)物后，利用Nextera XT Index Kit (Illumina公司)制備MiSeq用文庫。Nextera XT Index Kit中的引物能夠在待測文庫的兩端接入測序用adaptor和用于區(qū)分各個被檢測樣品的Index序列（見圖2）。

■ 保存

-20℃

■ 試劑盒以外需要準(zhǔn)備的其他試劑、儀器等（主要用品）

· 核酸提取Kit
【糞便樣品】
NucleoSpin DNA Stool (Code No. 740472.10/.50)等
【土壤樣品】
NucleoSpin Soil (Code No. 740780.10/.50/.250)等

· PCR產(chǎn)物的純化
Agencourt AMPure XP（Beckman Coulter公司，Code No. A63880/A63881/A63882）
0.2 ml磁力架：Magnetic Separator-PCR Strip（Code No. 635011）等
新配的80% 乙醇
溶出液（10 mM Tris-HCl, pH8.5）

· 測序adaptor與Index序列的添加
Nextera XT Index Kit（Illumina Code No. FC-131-1001/FC-131-1002）
Nextera XT Index Kit v2 set A-D（Illumina Code No. FC-131-2001～2004)

· PCR儀
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice^™ Touch（Code No. TP350）
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice^™ Gradient（Code No. TP600）等

· 凝膠電泳裝置
Mupid-2plus（Code No. M-2P）
Mupid-exU（Code No. EXU-1）等

· 凝膠
Agarose L03「TAKARA」（Code No. 5003/5003B）
PrimeGel^™ Agarose PCR-Sieve（Code No. 5810A）等

· 微量高速離心機(jī)

· 微量移液器及Tip

頁面更新：2024-05-07 13:23:57

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