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單細(xì)胞mRNA全長分析SMART-Seq HT Kit
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Clontech	634455	SMART-Seq^® HT Kit(庫存銷售完畢即終賣)	12 Rxns	￥4,769
Clontech	634456	SMART-Seq^® HT Kit(庫存銷售完畢即終賣)	48 Rxns	￥17,137
Clontech	634437	SMART-Seq^® HT Kit(庫存銷售完畢即終賣)	96 Rxns	￥33,001
Clontech	634438	SMART-Seq^® HT Kit(庫存銷售完畢即終賣)	192 Rxns	￥60,924
Clontech	634439	SMART-Seq^® HT Lysis Components	96 Rxns	￥1,284

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SMART-Seq HT Kit & SMART-Seq HT Plus Kit：自動化友好型的單細(xì)胞mRNA全長分析

· 自動化友好型 - 兼容自動化工作站，更少的時(shí)間分析更多的樣本
· 高靈敏度 - 可以從單細(xì)胞或10 pg總RNA起始（起始量：1-100個細(xì)胞或10 pg-1 ng總RNA）
· 高質(zhì)量的RNA-Seq數(shù)據(jù) - 保留全長基因信息，低rRNA比率，高基因檢出數(shù)，有效擴(kuò)增GC-rich轉(zhuǎn)錄本
· 單管操作流程 - SMART-Seq HT PLUS Kit包含完整的cDNA合成和文庫構(gòu)建流程，分別在單管中進(jìn)行，減少樣品損失與混淆，降低手動操作誤差
· 增強(qiáng)的測序性能 - SMART-Seq HT PLUS Kit整合雙端特殊index（UDI），即便多個文庫pool后用高通量型illumina測序儀（如Novaseq）分析，也能得到正確結(jié)果
· 更高的文庫產(chǎn)量 - 更便于使用高通量型illumina測序儀測序（如Novaseq），或保存剩余的文庫用于多次測序

注意： SMART-Seq mRNA HT是SMART-Seq HT Kit的等效替代品，本次更新并不影響這些試劑盒的流程和性能。

■ 產(chǎn)品說明

SMART-Seq HT Kit（SS-HT）和SMART-Seq HT Plus Kit（SS-HT PLUS）均兼容自動化移液工作站，采用oligo(dT)引物，支持1-100個細(xì)胞或10 pg-1 ng總RNA起始。
SS-HT試劑盒是從第4代的SMARTer Ultra Low試劑（SMART-Seq v4）發(fā)展而來的，具有簡化的操作流程，將原有的反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增步驟整合為一步，且不影響性能。細(xì)胞分離或RNA提取后，僅通過一步RT-PCR擴(kuò)增雙鏈cDNA，然后進(jìn)行純化完成操作。cDNA合成可在4小時(shí)內(nèi)完成，整個文庫構(gòu)建方案可在2天內(nèi)完成。而且，SMART-Seq HT試劑盒具有與SMART-Seq v4試劑盒相同的靈敏度和可重復(fù)性。核心的SMART技術(shù)，是一種對全轉(zhuǎn)錄組研究，以及包括細(xì)胞內(nèi)剪接位點(diǎn)，可變剪接研究的非常強(qiáng)大的工具，且可以檢測全長基因。 Oligo（dT）可以從高品質(zhì)總RNA（RIN> 8）或完整細(xì)胞中特異性擴(kuò)增mRNA。通過采用LNA技術(shù)，提升了模板轉(zhuǎn)換的效率與基因檢出數(shù)等性能。
SS-HT PLUS Kit在包含核心的cDNA合成試劑基礎(chǔ)上，同時(shí)整合了Takara Bio Group專利性的文庫構(gòu)建技術(shù)（U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727,10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823）及單次使用的雙端特殊index（UDI），提供完整的單細(xì)胞cDNA合成到文庫構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)體驗(yàn)。建庫試劑中包含片段化酶，以實(shí)現(xiàn)對合成cDNA的片段化，接著利用特別的莖環(huán)形接頭構(gòu)建高品質(zhì)illumina文庫。在建庫階段，單管兩步操作、過程中無需純化、2 h即可建成文庫！

■ SS-HT Kit：流程縮短、性能不變！

圖1 SMART-Seq HT的技術(shù)流程

圖2 SMART-Seq v4和SMART-Seq HT工作流程的比較

SMART-Seq HT（右）是由SMART-Seq v4方法（左）經(jīng)過改進(jìn)而來的一個手動操作時(shí)間更短的高通量工作流程。使用FACS方法獲得單細(xì)胞，SMART-Seq HT試劑盒只需3個操作步驟即可制備cDNA，而SMART-Seq v4試劑盒需要6步。SMART-Seq HT工作流程的一個重要步驟是一步RT-PCR，即使用一步RT-PCR緩沖液，進(jìn)行高效的反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增cDNA的過程。

圖3 使用SMART-seq v4 kit和SMART-Seq HT kit從FACS分選的293T細(xì)胞中獲得的高重復(fù)性的基因表達(dá)數(shù)據(jù)

使用SMART-Seq v4試劑盒（SSv4_1-SSv4_12）和SMART-Seq HT試劑盒（ HT_1-HT_9）（上圖）從21個293T細(xì)胞單細(xì)胞制備文庫，并對每個細(xì)胞獲得的基因表達(dá)性進(jìn)行評估。層次聚類熱圖展示了所有細(xì)胞之間的Euclidean distances，并顯示從0.74到0.97的Pearson相關(guān)性。不僅用相同試劑盒制備的細(xì)胞之間可以觀察到非常高的相關(guān)性，而在兩種試劑盒之間的相關(guān)性也非常高。這些數(shù)據(jù)表明，SMART-Seq HT的工作流程與SMART-Seq v4相比，在基因表達(dá)分析中沒有顯著的偏差。

■ SS-HT PLUS Kit：不只是一個Kit，更是完整的單細(xì)胞RNA-Seq建庫體驗(yàn)！

為了使單細(xì)胞cDNA合成、文庫構(gòu)建實(shí)驗(yàn)“一步”到位，我們?nèi)峦瞥隽薙S-HT PLUS Kit。