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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置:首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > RNA合成·體外轉(zhuǎn)錄 > RNA合成模板制備 > 常規(guī)限制酶BspQ I
常規(guī)限制酶BspQ I
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格(元) 說明書 數(shù)量
Takara 1227A BspQ I 500 U ¥872
Takara 1227B (A × 5) BspQ I 500 Ux5 ¥4,144
無標(biāo)題文檔
 
說明:
本產(chǎn)品從Lot No. AO52319A, AO72416A, AO90125A開始,由于酶活性測定法的變更,對(duì)“活性確認(rèn)”進(jìn)行了變更。
此變更不會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品性能發(fā)生變化,可以像以前一樣使用。
 
 
□ 識(shí)別不對(duì)稱的特定雙鏈DNA序列,在其外側(cè)的一定距離切割雙鏈的Type IIS限制酶
□ 在mRNA合成模板的Poly (A) 尾不殘留殘余堿基,防止翻譯效率的降低
□ 酶及反應(yīng)緩沖液(附帶試劑)中均不含BSA
 
■ 識(shí)別位點(diǎn)
 
■ 制品內(nèi)容(Code No. 1227A)
BspQ I (10 U/μl) 500 U
10× BspQ I Buffer 1 ml
 
■ 制品說明
BspQ I是一種Type IIS限制酶,可識(shí)別特定的不對(duì)稱雙鏈DNA序列,并在其外部的一定距離處切割雙鏈(Isoschizomer※1)。通過將識(shí)別序列整合到含有Poly (A)尾的質(zhì)粒模板中作為mRNA合成的IVT (體外轉(zhuǎn)錄) 模板,可以進(jìn)行mRNA設(shè)計(jì),在Poly (A) 尾后不會(huì)殘留多余堿基※2。
※1 Isoschizomer (同裂酶) 是識(shí)別相同堿基序列的不同來源的限制酶。了解更多:同裂酶一覽表 ※2 Poly (A) 尾后多余的堿基會(huì)導(dǎo)致mRNA翻譯成蛋白質(zhì)的效率降低,因此在使用IVT方法,合成mRNA為目的的模板DNA時(shí),不要在Poly (A) 下游殘留多余序列。(請(qǐng)參閱使用示例。Poly(A)序列后面剩余的堿基數(shù)與翻譯效率的關(guān)系) 。
 
■ 其他特性
溶液組成:酶及反應(yīng)緩沖液(附帶試劑)中不含BSA 。
反應(yīng)溫度: 與一般限制酶不同,最佳反應(yīng)溫度為50℃。
 
■ 用途
用于mRNA合成的模板質(zhì)粒的線性化
 
■ 保存
-20℃
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for BspQ I
 
■ 一般反應(yīng)混合物和培養(yǎng)時(shí)間體系和反應(yīng)時(shí)間
BspQ I * 1 μl
10XBspQ I Buffer 2 μl
DNA 1 μg
滅菌水 up to 20 μl
在50℃下孵育1小時(shí)。
* BspQ I最后添加到反應(yīng)液中
 
■ 反應(yīng)溫度
50℃
注:37℃時(shí)酶的活性下降到50℃時(shí)酶活性的30%左右。
 
■ 使用注意
不要?jiǎng)×一靹蛎钢破贰?/span>
 
■ 活性確認(rèn)
在50 μl反應(yīng)體系、50℃溫度下反應(yīng)1小時(shí),切割10 pmol熒光標(biāo)記探針的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。
 
■ 熱失活
70℃加熱20 min
 
■ 甲基化的影響
該酶對(duì)damdcm和CpG甲基化不敏感。
 
■ Star活性
Star活性可能是由于過度孵育(例如>4小時(shí))造成的。
 
 

頁面更新:2024-12-11 08:44:48