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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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感受態(tài)細(xì)胞Takara Stable Competent Cells
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說(shuō)明書 數(shù)量
Takara 9132 Takara Stable Competent Cells 100μl × 10 ￥1,700
無(wú)標(biāo)題文檔
 
■ 制品內(nèi)容
Takara Stable Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC media* 1 ml × 10
*SOC Media:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品說(shuō)明
Takara Stable Competent Cells通過(guò)破壞同源重組相關(guān)的遺傳基因，來(lái)提高DNA的穩(wěn)定性。因此，它適用于克隆不穩(wěn)定的DNA，包括poly(A)序列和重復(fù)序列等。此外，由于本產(chǎn)品缺失T1噬菌體感染所需的fhuA遺傳基因，因此對(duì)該噬菌體具有抗性。
推薦使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix（Code No. 638943/638944/638947～638949）進(jìn)行克隆。使用pUC類載體時(shí)，可利用β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)性，通過(guò)X-Gal＊分解，對(duì)菌落進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。
＊X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 細(xì)胞濃度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
F-,endA1,supE44,thi-1,recA1,relA1,gyrA96,p>hoA,ΔsbcCD,Φ80 dlacZΔM15,ΔfhuA,Δ(lacZYA-argF)U169,Δ(mrr-hsdRMS- mcrBC) ,ΔmcrA,λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果未在-80℃下保存，轉(zhuǎn)化效率將會(huì)降低。請(qǐng)使用附帶的 pUC19對(duì)照質(zhì)粒來(lái)確認(rèn)保存細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。不能液氮保存。
 
■ 注意事項(xiàng)
· 請(qǐng)按需取用感受態(tài)細(xì)胞。轉(zhuǎn)移時(shí)，請(qǐng)放入干冰/乙醇中。
· 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml圓底tubes (BD Code 352059或352057等)（詳見使用方法步驟2），但效率可能會(huì)降低。
· 使用100μl的感受態(tài)細(xì)胞時(shí)，加入的高純度DNA樣品不要超過(guò) 10 ng。否則轉(zhuǎn)化效率會(huì)降低。當(dāng)改變感受態(tài)細(xì)胞數(shù)量或tube類型時(shí)，適當(dāng)調(diào)整反應(yīng)條件。例如，當(dāng)使用1.5 ml microcentrifuge tubes時(shí)，42℃溫育60秒（詳見使用方法步驟5.）。
· 培養(yǎng)時(shí)，請(qǐng)根據(jù)所用載體，將抗生素添加至培養(yǎng)基中。
· 當(dāng)加入X-Gal時(shí)，按照以下操作進(jìn)行：
將20 mg/ml X-Gal（溶解于二甲基甲酰胺)按200-300 μl/100 ml的比例加入到瓊脂培養(yǎng)基中。
· 不建議將解凍的感受態(tài)細(xì)胞再次冷凍保存。
 
 

頁(yè)面更新：2024-01-31 15:19:42