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產(chǎn)品選擇指南

技術服務信息

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新品┃高安全性、高效價的慢病毒包裝方案新選擇
 
慢病毒是一種可用于在包含原代細胞、干細胞、神經(jīng)細胞等非分裂細胞在內(nèi)的哺乳動物細胞中進行基因?qū)氲亩嘤猛竟ぞ摺?strong>Takara推出的新品LVpro™ Packaging Mix with pLVpro系列載體可以幫助你獲得高安全性、高效價的慢病毒。
 
■產(chǎn)品介紹
LVpro Packaging Mix是經(jīng)過優(yōu)化的質(zhì)粒混合物，高效表達慢病毒制備所需要的成分，可包裝生產(chǎn)高滴度重組慢病毒。
 
pLVpro vector是tat非依賴性第三代慢病毒載體，其中5’LTR的U3區(qū)域被CMV啟動子取代，并且在不影響感染滴度的情況下刪除了包裝信號附近的HIV來源序列。
 
將pLVpro vector和LVpro Packaging Mix共轉染Lenti-X 293T細胞，包裝質(zhì)粒瞬時表達Gag、Pol、Rev和VSV-G包膜蛋白，這有助于將重組病毒RNA（從pLVpro慢病毒載體轉錄而來）包入完整的病毒粒子中。使用這種經(jīng)過優(yōu)化的包裝質(zhì)?；旌衔锖透咝мD染Lenti-X 293T細胞的轉染試劑Trans IT-Virus-GEN（Mirus Bio, Code No. MIR 6700）或Trans IT-293（Mirus Bio, Code No. MIR 2700），可以獲得高滴度的重組慢病毒，而且在多數(shù)情況下，該病毒可用于直接感染靶細胞，而不需要事先進行濃縮處理。
 
■產(chǎn)品特點
·HIV-1 tat非依賴性第三代慢病毒載體
·臨床使用可能，將HIV-1來源序列排除到極限，提高安全性
·優(yōu)化了包裝系統(tǒng)，制備高滴度慢病毒粒子
·和3’LTR/ΔU3 pLVpro vector組合使用可進行P2實驗（注：取決于插入基因）
 
■實驗例1
LVpro Packaging Mix和其他品牌同類試劑盒制備的慢病毒滴度比較
 
將表達ZsGreen1的慢病毒載體和包裝質(zhì)粒共轉染Lenti-X 293T細胞制備重組慢病毒，使用HT-1080細胞評估其生物學效價。與全部使用A公司產(chǎn)品的場合【1】相比，部分使用Takara產(chǎn)品的場合【2、3】得到的慢病毒滴度要高出10倍。另外，在全部使用Takara產(chǎn)品的場合【4】得到慢病毒滴度是最高的。
 
■實驗例2
兩種慢病毒基因?qū)敕椒ū容^：RBV-Spin法 vs Polybrene法
 
使用LVpro Packaging Mix制備表達ZsGreen1的慢病毒并進行30倍稀釋，然后分別通過RetroNectin（Code No. T100A）的RBV（RetroNectin Bound Virus）-Spin法或Polybrene法對人外周血單核細胞（PBMC）進行基因?qū)?，比較這兩種方法的轉導效率。
感染3天后回收細胞，測定ZsGreen1陽性細胞率。結果顯示，Polybrene法的陽性率為10%左右，而RBV-Spin法的陽性率在20%以上，與Polybrene法相比顯示出較高的陽性率。
 
■產(chǎn)品列表
Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量
6195 LVpro Packaging Mix 60 Rxns
6962 LVpro Packaging Mix（pLVpro-MSCV Vector) 1 Set
6963 LVpro Packaging Mix（pLVpro-MSCV-EI Vector) 1 Set
6964 LVpro Packaging Mix（pLVpro-EF1α Vector) 1 Set
6965 LVpro Packaging Mix（pLVpro-MSCV-ZsGreen1 Vector) 1 Set
6966 LVpro Packaging Mix（pLVpro-MSCV-EI-ZsGreen1 Vector) 1 Set
6967 LVpro Packaging Mix（pLVpro-EF1α-ZsGreen1 Vector) 1 Set
 
 

頁面更新：2022-08-30 15:51:46