■ 制品內(nèi)容 |
·LVpro Packaging Mix (Code No. 6195) LVpro Packaging Mix,60次用量*1(140 μl × 3) *1:當(dāng)使用100-mm培養(yǎng)皿時(shí)。 |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV Vector) (Code No. 6962) |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV-EI Vector) (Code No. 6963) |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-EF1 α Vector) (Code No. 6964) |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV-ZsGreen1 Vector) (Code No. 6965) |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-MSCV-EF1-ZsGreen1 Vector) (Code No. 6966) |
·LVpro Packaging Mix (pLVpro-EF1 α -ZsGreen1 Vector) (Code No. 6967) Code No. 6962-6967是由LVpro Packaging Mix (Code No. 6195) 和不同pLVpro Vector(Code No. 6956–6961)組成的套裝,所包含的pLVpro Vector不單獨(dú)銷售。 pLVpro Vectors (Code No. 6956-6961):濃度為0.5 μg/μl, 質(zhì)量為20 μg,體積為40 μl。 |
Limited Use Label License (Code No. 6962-6967):[M105] |
■ 制品說(shuō)明 |
·HIV-1 tat非依賴性第三代慢病毒載體 ·臨床使用可能 ,將HIV-1來(lái)源序列排除到極限 ,提高安全性 ·優(yōu)化了包裝系統(tǒng),制備高滴度慢病毒粒子 ·和3’LTR/ΔU3 pLVpro vector組合使用可進(jìn)行P2實(shí)驗(yàn)(注:取決于插入基因) |
LVpro Packaging Mix是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的質(zhì)?;旌衔?,高效表達(dá)慢病毒制備所需要的成分,用于包裝生產(chǎn)高滴度重組慢病毒。將pLVpro慢病毒載體和LVpro包裝質(zhì)?;旌衔锕厕D(zhuǎn)染Lenti-X 293T細(xì)胞,包裝質(zhì)粒瞬時(shí)表達(dá)Gag、Pol、Rev和VSV-G包膜蛋白,這有助于將重組病毒RNA(從pLVpro慢病毒載體轉(zhuǎn)錄而來(lái))包入完整的病毒粒子中(圖1)。使用這種經(jīng)過(guò)優(yōu)化的包裝質(zhì)?;旌衔锖透咝мD(zhuǎn)染Lenti-X 293T細(xì)胞的轉(zhuǎn)染試劑Trans IT-Virus-GEN(Mirus Bio, Code No. MIR6700)或Trans IT-293(Mirus Bio, Code No. MIR2700),可以獲得高滴度的重組慢病毒,而且在多數(shù)情況下,該病毒可用于直接感染靶細(xì)胞,而不需要事先進(jìn)行濃縮處理。 |
pLVpro vector是tat非依賴性第三代慢病毒載體,其中5’LTR的U3區(qū)域被CMV啟動(dòng)子取代,并且在不影響感染滴度的情況下刪除了包裝信號(hào)附近的HIV來(lái)源序列。 |
圖1. 使用LVpro Packaging Mix和Lenti-X 293T cells制備慢病毒。 |
使用LVpro Packaging Mix和攜帶目標(biāo)基因的pLVpro慢病毒載體共轉(zhuǎn)染Lenti-X 293T cells(Step1),產(chǎn)生相應(yīng)的重組慢病毒基因組RNA轉(zhuǎn)錄本和病毒包裝蛋白(Step2)。重組病毒RNA基因組上的包裝信號(hào)(ψ)被包裝蛋白所識(shí)別(Step3),使重組病毒RNA和包裝蛋白相結(jié)合,形成病毒核心并被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜(Step4)。在那里,病毒核心被包含VSV-G包膜蛋白的細(xì)胞膜包裹。這樣成熟的具有感染性的病毒粒子從細(xì)胞中產(chǎn)生了(Step5),這些病毒粒子會(huì)被釋放到培養(yǎng)液中,然后從培養(yǎng)液中回收病毒粒子(Step6)。 |
雖然用這種試劑盒產(chǎn)生的病毒粒子是具有感染性的,但它們?nèi)鄙僭诎屑?xì)胞中復(fù)制和增殖所必需的七種基因。該試劑盒使用了多種不同的質(zhì)粒用于表達(dá)病毒蛋白,因此除非多次發(fā)生低頻重組,否則很難產(chǎn)生具有復(fù)制能力的病毒,這樣試劑盒的使用是非常安全的。 |
■ 保存 |
-20℃ |
LVpro Packaging Mix with pLVpro系列載體 |
頁(yè)面更新:2024-02-29 10:18:45