|
■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR350A) |
SapphireAmp Fast PCR Master Mix |
1 ml × 4 |
dH2O |
1 ml × 4 |
|
|
|
|
■ 制品說明 |
SapphireAmp Fast PCR Master Mix是適合于快速PCR (延伸速度為10 sec./kb) 反應(yīng)用試劑 (酶、Buffer、dNTP Mixture等) 的2倍濃度的預(yù)混型制品,DNA Polymerase使用了性能良好的Hot Start酶。并且,本制品中已含有電泳時(shí)所必需的色素試劑 (遷移速度不同的兩種藍(lán)色色素),PCR反應(yīng)后可以直接進(jìn)行電泳。使用本制品時(shí),只需要在制品溶液中加入模板和引物便可以進(jìn)行PCR反應(yīng),PCR反應(yīng)結(jié)束后即可直接電泳觀察結(jié)果,簡化了操作步驟。
使用本制品直接進(jìn)行菌落PCR檢測插入片段 (推薦擴(kuò)增低于5 kb片段),短時(shí)間內(nèi)可以得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (5 kb片段擴(kuò)增所需時(shí)間約為1小時(shí)15分鐘) 。以人基因組DNA為模板可以擴(kuò)增6 kb的DNA片段。
|
|
預(yù)變性說明如下:
※ 當(dāng)對長片段或富含GC序列等復(fù)雜的模板進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),如有必要,可進(jìn)行94℃ 1 min的預(yù)變性處理 (過度熱處理可能會(huì)導(dǎo)致PCR酶失活)。 |
|
■ 保存 |
-20℃ (4℃可以保存3個(gè)月)。
反復(fù)凍融活性可能降低,使用頻率高時(shí),融解后請于4℃保存,使用前顛倒混勻,輕輕離心后使用。 |
|
|
■ 用 途 |
1. PCR法擴(kuò)增DNA。
2. 菌落直接PCR。 |
|
■ 電泳時(shí)色素Marker位置 |
反應(yīng)液5 μl,1% TaKaRa Agarose L03 [TAKARA] (Code No. 5003/5003B) 電泳時(shí),兩種藍(lán)色色素分別在1 kb和3~5 kb附近,分別在260 nm和620 nm處有吸收峰。如果需要,可通過使用NucleoSpin® Gel and PCR Clean-up (Code No. 740609.50/.250)或切膠回收來去除染料進(jìn)行DNA純化。 |
|
■ PCR產(chǎn)物 |
使用本制品擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3’端附有一個(gè)“A”堿基,因此可直接克隆于T-Vector中。也可以在末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端載體。 |
|
|
Technote: |
|
|