■ 制品內(nèi)容 (Code No.: R013A : 50 μl反應(yīng)×200次量) | ||||||||||||||
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■ 制品說明 | ||||||||||||||
PCR是一種非常敏感的DNA擴(kuò)增技術(shù),易受污染影響,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染會產(chǎn)生假陽性結(jié)果。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是End-point PCR方法,特別在食品、環(huán)境檢測中是令人頭痛的問題。 本制品是一種可防止假陽性產(chǎn)生的試劑盒。使用本制品是在PCR反應(yīng)時以dUTP取代dTTP,并同時使用Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Taq HS進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)液配制后,對含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)可選擇性水解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,而對不含尿嘧啶的模板無任何影響。 UNG的作用原理:在PCR反應(yīng)前25℃、10分鐘反應(yīng)中,UNG酶可水解PCR反應(yīng)液中含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵,產(chǎn)生脫嘧啶位點。隨后進(jìn)行95℃、2分鐘熱處理,在UNG酶失活的同時進(jìn)一步對磷酸骨架水解,從而消除含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的污染。 UNG酶可以作用于單鏈或雙鏈DNA,對RNA無活性。 |
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頁面更新:2023-11-01 16:16:24