PrimeScript FAST RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)的專用反轉(zhuǎn)錄試劑。試劑盒中使用了具有較強(qiáng)DNA分解活性的gDNA Eraser,42℃,2 min即可除去基因組DNA,之后添加含有完全抑制DNA分解活性成分的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑,進(jìn)行10分鐘的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。由于基因組去除試劑和反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑預(yù)先進(jìn)行了預(yù)混化,因此,通過向RNA樣品中依次添加試劑的簡便操作,可以毫無損失地進(jìn)行從基因組DNA去除到cDNA合成的反應(yīng)。
本試劑盒尤其適用于存在基因組殘留問題的Real Time RT-PCR分析,例如無法設(shè)計合適引物的單外顯子基因或沒有大內(nèi)含子的基因,以及由于假基因的存在無法避免基因組來源的非特異性擴(kuò)增時。
使用本制品合成的cDNA適用于嵌合熒光法和探針法qPCR分析??梢愿鶕?jù)實驗?zāi)康?,選擇與TB Green® Premix Ex Taq™ II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)、TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 、Probe qPCR Mix, with UNG (Code No. RR392S/A/B)等定量PCR試劑組合使用。 |
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■ 保存 |
-20℃。
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■ 特長 |
1. 在短短15分鐘內(nèi)完成從去除基因組DNA到cDNA合成的反應(yīng)。
2. 只需依次添加預(yù)混試劑的簡便操作,即可進(jìn)行反應(yīng)。
3. 通過單管反應(yīng)可以從模板RNA中毫無損失地合成cDNA。
4. Random 6 mers和Oligo dT Primer作為反轉(zhuǎn)錄引物,預(yù)先包含在5X RT Premix中,可以均勻地合成RNA的全部區(qū)域。
5. 本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution II(for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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■ 使用注意 |
1.使用本制品合成的cDNA與TB Green關(guān)聯(lián)制品組合使用時,建議使用以下TB Green Premix系列。
與本制品組合使用,可以得到可信度高的結(jié)果。
TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
本制品與TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 組合使用時,有時反應(yīng)性能不好,不推薦使用。
2.8X gDNA Eraser Premix和5X RT Premix前在使用前需顛倒混勻,輕輕離心后使用。
3.分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭(Tip),以防止樣品間污染。
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Takara qPCR專用快速反轉(zhuǎn)錄試劑 |
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