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產(chǎn)品選擇指南

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快速qPCR試劑TB Green^® Premix Ex Taq^™ II FAST qPCR
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	CN830S	TB Green^® Premix Ex Taq^™ II FAST qPCR	25 μl反應(yīng)×80次	￥256
Takara	CN830A	TB Green^® Premix Ex Taq^™ II FAST qPCR	25 μl反應(yīng)×400次	￥1,130

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無標(biāo)題文檔

■ 制品內(nèi)容 (CN830S：25 μl反應(yīng)×80次、CN830A：25 μl反應(yīng)×400次)

	Code No.	CN830S	CN830A
TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR（2X）^*1		1 ml × 1	1 ml × 5
EASY Dilution II（for Real Time PCR）^*2		1 ml × 1	1 ml × 3

1 內(nèi)含突變型Taq* HS，dNTP Mixture，Mg²⁺，Tli RnaseH、Uracil DNA Glycosylase(UNG)，heat-labile、通用參比染料、可視化色素和TB Green。 *2 在逐步稀釋total RNA和cDNA時，將其用作稀釋溶液。如果用水或TE稀釋，可能無法進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋，但使用EASY Dilution II（for Real Time PCR）可以準(zhǔn)確稀釋至低濃度，并在寬廣的范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。請注意，此緩沖系統(tǒng)不會影響反轉(zhuǎn)錄或PCR的反應(yīng)性。稀釋的模板溶液可以直接用作反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)或PCR反應(yīng)的模板。注：請勿使用EASY Dilution（for Real Time PCR）（Code No. 9160）稀釋本制品。

Limited Use Label License：[M82]

■ 制品說明

本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。本制品將適用于快速PCR反應(yīng)的突變型Taq DNA聚合酶和抑制引物二聚體的因子組合，優(yōu)化了反應(yīng)液組成，在保證特異性的同時，實現(xiàn)快速PCR反應(yīng)和在寬廣的動態(tài)定量區(qū)域內(nèi)對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測，重復(fù)性好。此外, 2X Premix試劑中，已預(yù)先添加了Tli RNaseH（耐熱性RNaseH）和UNG，以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時，Tli RNaseH可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用，UNG可避免擴(kuò)增過程中的交叉污染。
本制品是2X濃度的Premix型試劑，預(yù)先混有通用參比染料和可視化色素，無需額外在儀器中添加參比試劑以校正孔間熒光信號，可視化色素可以最大限度地減少操作錯誤。

■ 保存

4℃。

注意：	4℃可保存3個月。
	避光保存，避免污染。
	長期保存請置于-20℃，一旦開始使用請于4℃保存并在3個月之內(nèi)使用完。

■ 產(chǎn)品特點

♦ 高速反應(yīng)

突變型Taq DNA聚合酶，適用于延伸時間10秒的快速PCR反應(yīng)程序

♦ 高特異性

buffer添加了引物二聚體抑制因子，最大限度抑制引物二聚體的形成

♦ 高熒光信號

熒光信號值更高，擴(kuò)增曲線&溶解曲線線型更好，信噪比更高

♦ 高穩(wěn)定性

實驗驗證的多個基因，反應(yīng)液配置后室溫放置48小時仍具有高穩(wěn)定性，較長操作時間也可獲得穩(wěn)定結(jié)果

♦ 各儀器平臺通用

預(yù)混通用參比染料，無需額外添加校正孔間熒光信號的參比染料

♦ 防止carryover污染

預(yù)混UNG，避免擴(kuò)增過程中交叉污染導(dǎo)致的假陽性。PCR程序中使用或不使用可自由選擇

♦ 防止加樣錯誤

預(yù)混可視化色素，減少操作錯誤

■ 試劑盒特長

1. 通過Real Time PCR反應(yīng)，可以快速、準(zhǔn)確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 本制品是預(yù)先混有TB Green的2X 濃度的Premix試劑，只需加入引物、模板、滅菌水便可通過嵌合熒光檢測法進(jìn)行Real Time PCR反應(yīng)。
3. PCR反應(yīng)使用的是可進(jìn)行快速PCR反應(yīng)的突變型Taq HS。緩沖buffer結(jié)合了引物二聚體抑制因子，適用于實時PCR。最大限度的抑制了引物二聚體的形成，可以在較短的延伸時間內(nèi)，以高靈敏度的S/N比進(jìn)行檢測。
4. 在2X Premix試劑中，預(yù)先添加了耐熱性RNaseH (Tli RNaseH)和UNG，Tli RNaseH可以很好地抑制以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時，由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用，UNG可避免擴(kuò)增過程中的交叉污染。
5. 預(yù)先在2X預(yù)混試劑中添加了通用參比染料和可視化色素，無需在儀器中額外添加參比試劑以校正孔間熒光信號。

■ 注意事項

以下為使用本試劑盒時的注意事項，使用前一定認(rèn)真閱讀。
1. 進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)時，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)推薦如下試劑。與本制品組合使用，可以得到可信度高的結(jié)果。
PrimeScript^™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037Q/A/B)
PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036Q/A/B)
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)（Code No. RR047A/B）
2. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡，試劑混勻后再使用。試劑混合不均勻會造成反應(yīng)效果不佳。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X)在-20℃保存時，可能會產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀?？捎檬治站徛芙?，或于室溫短時間避光放置后，上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會導(dǎo)致試劑組份不均勻，必須混勻后再使用。
3. 配制反應(yīng)液時，試劑請于冰上放置。
4. 本制品中含有熒光染料TB Green，配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強(qiáng)光照射。使用后的TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X) 應(yīng)立即避光存儲。
5. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的一次性槍頭、盡量避免樣品間的污染。
6. 如果定量PCR儀器無法設(shè)置延伸時間為10s的快速反應(yīng)程序，請使用儀器可以設(shè)置的最短延伸時間（＞10s）。