本制品是采用TB Green嵌合熒光法進行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應的最適濃度TB Green和ROX Reference Dye,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進行實驗時,PCR反應液的配制十分方便簡單。
本制品中還添加了Tli RNaseH (耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進行PCR反應時,可以很好抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用。
本制品Buffer經(jīng)過改良,反應特異性更高,能抑制非特異性反應,可以在寬廣的范圍內進行更加準確的定量。本Buffer和Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS組合使用,可以進行重復性好、可信度高的Real Time PCR解析。 |
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■ 保存 |
4℃可保存6個月。
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避光保存,避免污染。 |
長期保存請置于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存,并在6個月內用完。 |
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■ 注意事項 |
1. 使用前,請上下輕輕顛倒混勻,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應效果不佳。
(1)
請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq II (2X) (Tli RNaseH Plus), ROX plus在-20℃存放可能會產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手握緩慢溶解,于室溫 (<30℃) 短時間避光放置,輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會導致溶液成分不均勻,使用前務必充分混勻試劑。
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2. 配制反應液時,試劑請于冰上放置。
3. 本制品中含有ROX Reference Dye和TB Green,配制PCR反應液時應避免強光照射。
4. 反應液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗體的Hot Start用DNA聚合酶,與其他公司的化學修飾型Hot Start用DNA聚合酶相比,不需要PCR反應前的95℃、5~15分鐘的酶的活性化反應。如果高溫處理時間過長,會使酶的活性下降,其PCR的擴增效率、定量準確度等都會受到影響。如果在PCR反應前進行模板的預變性,通常設定為95℃、30秒。 |