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■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR42LR: 50 μl反應(yīng)×200次量) |
TB Green Premix Ex Taq (2X) (Tli RNaseH Plus),ROX plus* |
5 ml |
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* 內(nèi)含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,TB Green和ROX Reference Dye。
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Limited Use Label License:[M82]
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■ 制品說(shuō)明 |
本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專(zhuān)用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的適宜濃度TB Green和ROX Reference Dye,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡(jiǎn)單。制品中使用了抗Taq抗體的的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq®HS,與Real Time PCR用適合Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增,大大提高PCR的擴(kuò)增效率,可以進(jìn)行高靈敏度的Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH (耐熱性RNaseH) ,以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí),可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對(duì)PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
本制品適合于快速Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測(cè),重復(fù)性好,可信度高。
適用的Real Time PCR擴(kuò)增儀
◆ 需要使用ROX Reference Dye進(jìn)行信號(hào)校正的儀器
· StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)*1
◆ 不需要使用ROX Reference Dye進(jìn)行信號(hào)校正的儀器
· Thermal Cycler Dice™ Real Time System III (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)*2
· Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code No.TP700/TP760)*2
· Smart Cycler II System (Cepheid)
*1 對(duì)于Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific),需要使用ROX Reference Dye II校正,推薦使用TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus), Bulk (Code No. RR420L/W)。
*2 使用Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960:終賣(mài))時(shí),建議使用TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)系列制品(Code No. RR820Q/A/B/L/W、RR82LR/WR)。 |
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■ 保存 |
4℃可保存6個(gè)月。
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避光保存,避免污染。 |
長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-20℃。產(chǎn)品融解后請(qǐng)于4℃保存,并在6個(gè)月內(nèi)用完。 |
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■ 注意事項(xiàng) |
1. 使用前,請(qǐng)上下輕輕顛倒混勻,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應(yīng)效果不佳。
(1)
請(qǐng)勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq (2X) (Tli RNaseH Plus),ROX plus在-20℃存放可能會(huì)產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手握緩慢溶解,于室溫短時(shí)間避光放置,輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會(huì)導(dǎo)致溶液成分不均勻,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
2. 配制反應(yīng)液時(shí),試劑請(qǐng)于冰上放置。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green和ROX Reference Dye,配制PCR反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請(qǐng)一定使用新的 (無(wú)污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗體的Hot Start用DNA聚合酶,與其他公司的化學(xué)修飾型Hot Start用DNA聚合酶相比,不需要PCR反應(yīng)前的95℃、5~15分鐘的酶的活性化反應(yīng)。如果高溫處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)使酶的活性下降,其PCR的擴(kuò)增效率、定量準(zhǔn)確度等都會(huì)受到影響。如果在PCR反應(yīng)前進(jìn)行模板的預(yù)變性,通常設(shè)定為95℃、30秒。 |
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